實驗動物技能培訓考試及答案

實驗動物技能培訓考試及答案一、單項選擇題（共20題，每題1分，共20分。每題只有1個正確答案，多選、錯選、不選均不得分）1.依據《實驗動物微生物學等級及監測》國家標準，我國實驗動物按微生物控制程度共分為（）個等級A.2B.3C.4D.52.實驗動物倫理審查的核心3R原則不包含下列哪項內容（）A.替代B.減少C.優化D.重復3.依據《實驗動物環境及設施》（GB14925-2010），SPF級大小鼠飼養的屏障環境溫濕度要求為（）A.溫度18-22℃，相對濕度30-50%B.溫度20-26℃，相對濕度40-70%C.溫度22-28℃，相對濕度50-80%D.溫度16-20℃，相對濕度30-60%4.實驗動物生產許可證、使用許可證的法定有效期為（）年A.1B.3C.5D.105.下列小鼠品系中屬于近交系的是（）A.ICRB.C57BL/6C.KMD.NIH6.SPF級小鼠飼養使用的獨立通風籠（IVC），在飼養密度符合要求的前提下，籠具更換頻率應為（）A.每3天1次B.每1-2周1次C.每3周1次D.每月1次7.成年健康小鼠總血量約為體重的6-8%，短期單次采血的安全劑量不應超過總血量的10%，換算為體重占比約為（）A.0.2%B.0.6%C.1.2%D.1.8%8.大小鼠安樂死的首選人道方法為（）A.頸椎脫臼法B.空氣栓塞法C.二氧化碳窒息法D.斷頭法9.操作感染高致病性病原微生物的實驗動物，應在（）級生物安全實驗室開展A.BSL-1B.BSL-2C.BSL-3D.BSL-410.近交系實驗動物的近交系數要求至少達到（）A.90%B.95%C.98.6%D.99.9%11.小鼠灌胃給藥的標準進針深度為（）A.1-2cmB.2-3cmC.3-4cmD.4-5cm12.戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉成年小鼠的常用標準劑量為（）A.10-20mg/kgB.30-40mg/kgC.40-60mg/kgD.80-100mg/kg13.屏障環境內潔凈走廊與動物飼養室的壓差應至少保持（），避免空氣逆流污染A.5PaB.10PaC.20PaD.30Pa14.體內外攜帶已知種類微生物的實驗動物屬于（）范疇A.普通級動物B.清潔級動物C.SPF級動物D.悉生動物15.SPF級實驗動物的飲水應符合（）要求A.市政自來水B.市售純凈水C.高壓滅菌或超濾除菌水D.天然礦泉水16.懷孕雌鼠為避免產仔后仔鼠被同籠其他動物啃食，應在受孕后（）天單獨分籠飼養A.7-9B.10-12C.14-16D.18-2017.實驗動物產生的病理性廢棄物（尸體、組織等）的正確處理方式為（）A.直接投入生活垃圾B.自行焚燒處置C.高壓滅菌后交由具備資質的危廢處置機構處理D.低溫冷凍后丟棄18.實驗過程中動物出現中度及以上疼痛時，觀察頻率應至少為（）A.每4小時1次B.每天1次C.每2天1次D.每周1次19.依據國標要求，成年小鼠的標準飼養密度為：每籠（規格300mm×200mm×150mm）飼養成年鼠不超過（）只A.3B.5C.8D.1020.下列人員中可以進入屏障環境開展動物實驗的是（）A.未取得實驗動物從業人員上崗證的學生B.感冒發熱的工作人員C.佩戴首飾、涂抹化妝品的人員D.經過培訓持證、無基礎疾病、未攜帶外源污染物的人員二、多項選擇題（共10題，每題3分，共30分。每題有2個及以上正確答案，多選、少選、錯選、不選均不得分）1.實驗動物福利的五大自由包含下列哪些內容（）A.不受饑渴的自由B.生活舒適的自由C.不受痛苦、傷害和疾病的自由D.表達天性的自由E.不受恐懼和焦慮的自由2.進入屏障環境的標準流程包含下列哪些步驟（）A.一更脫去個人外衣、鞋物，洗手消毒B.二更穿戴無菌實驗服、口罩、帽子、手套、鞋套C.風淋室風淋30秒以上，吹除表面浮塵D.經潔凈走廊進入對應飼養/操作區域E.直接開門進入污染區域開展操作3.下列屬于實驗動物倫理審查范疇的項目有（）A.教學演示用大鼠解剖實驗B.新藥藥效學評價小鼠實驗C.化妝品毒理學檢測兔實驗D.實驗動物常規飼養繁育（不涉及實驗操作）E.野生動物獵捕后開展的病原檢測實驗4.SPF級動物設施日常環境監測的必備指標包含（）A.溫濕度、日溫差B.區域壓差、空氣潔凈度C.沉降菌、浮游菌數D.氨濃度、噪聲、照度E.飲用水微生物指標5.下列屬于大小鼠合規安樂死方法的有（）A.二氧化碳梯度濃度窒息法B.過量異氟烷吸入麻醉法C.過量戊巴比妥鈉注射法D.未麻醉狀態下空氣栓塞法E.體重小于200g小鼠規范操作的頸椎脫臼法6.動物實驗過程中產生的廢棄物分類包含（）A.感染性廢物B.損傷性廢物C.病理性廢物D.化學性廢物E.生活垃圾7.近交系實驗動物的特點包含（）A.基因純合度高B.表型均一性好C.個體間遺傳背景一致D.實驗重復性好E.繁殖能力強、成本低8.實驗動物飼養過程中禁止的行為有（）A.未經審批在飼料中添加抗生素、激素類藥物B.隨意調整飼養環境溫濕度參數C.將不同來源、不同品系、不同等級的動物混養D.定期更換籠具、補充飼料飲水E.粗暴抓取、恐嚇實驗動物9.兔耳緣靜脈注射給藥的操作注意事項包含（）A.注射前用酒精棉球擦拭耳緣，使血管擴張B.從耳尖部位進針，逐漸向耳根移動C.進針后回抽見回血再緩慢推藥D.注射完畢后用棉球按壓止血5分鐘以上，避免血腫E.多次注射時可重復使用同一穿刺位點10.違反《實驗動物管理條例》的行為有（）A.未取得實驗動物使用許可證擅自開展動物實驗B.使用無質量合格證明的實驗動物發表科研論文C.將實驗動物帶出設施隨意丟棄、放生D.實驗結束后對動物采用人道方法安樂死E.偽造實驗動物倫理審查記錄、使用記錄三、判斷題（共10題，每題2分，共20分。正確打√，錯誤打×）1.普通級實驗動物可以用于所有級別科研項目的正式實驗（）2.為減少實驗動物使用量，所有實驗后的動物均可重復用于其他項目實驗（）3.屏障環境內可以攜帶手機、食品、個人飾品等物品進入（）4.悉生動物屬于無菌級實驗動物范疇，飼養環境要求與無菌級動物一致（）5.體重大于300g的大鼠推薦使用頸椎脫臼法進行安樂死（）6.實驗動物生產許可證和使用許可證在全國范圍內有效（）7.動物實驗操作前無需對動物進行應激適應，直接操作即可（）8.大小鼠腹腔注射給藥時應采取頭低腳高體位，避免刺傷肝臟、腸道等臟器（）9.實驗動物使用記錄、倫理審查記錄應至少保存至實驗結束后5年（）10.實驗過程中使用的針頭、刀片等銳器應投入專用銳器盒，不得混入其他廢棄物（）四、實操簡答題（共3題，每題6分，共18分）1.簡述SPF級小鼠腹腔注射給藥的操作要點及注意事項。2.簡述實驗動物倫理審查的核心內容。3.簡述小鼠眼眶靜脈叢采血的操作流程及安全劑量要求。五、案例分析題（共1題，12分）某高校科研人員為快速完成新藥抗腫瘤藥效學實驗，未提交倫理審查申請，從無實驗動物生產許可證的商戶處購買120只未明微生物等級的小鼠，在未取得實驗動物使用許可證的普通生物學實驗室開展實驗，實驗過程中未采取麻醉鎮痛措施，多次對小鼠進行活體取瘤操作，實驗結束后直接將存活小鼠摔死，尸體隨普通生活垃圾丟棄，后續被當地科技行政部門、生態環境部門聯合查處。請結合我國實驗動物管理相關法規、標準，指出該人員的全部違規行為，并說明合規操作流程。參考答案一、單項選擇題1.C2.D3.B4.C5.B6.B7.B8.C9.C10.C11.B12.C13.B14.D15.C16.C17.C18.A19.B20.D二、多項選擇題1.ABCDE2.ABCD3.ABCE4.ABCDE5.ABCE6.ABCD7.ABCD8.ABCE9.ABCD10.ABCE三、判斷題1.×2.×3.×4.√5.×6.√7.×8.√9.√10.√四、實操簡答題1.SPF級小鼠腹腔注射給藥操作要點及注意事項：（1）操作要點：①操作人員穿戴無菌防護用品，在屏障環境內超凈臺開展操作；②左手固定小鼠，拇指、食指捏住小鼠頸背部皮膚，無名指、小指固定尾部和后肢，使小鼠腹部朝上、頭低腳高，臟器自然移向橫膈部位；③注射部位選擇下腹部左/右側外1/3處，用75%酒精消毒皮膚；④右手持注射器，進針角度30-45°刺入皮膚后調整為平行進針1-2mm，再垂直刺入腹腔，有明顯落空感后停止進針；⑤回抽注射器活塞，確認無回血、無尿液、無腸內容物后，緩慢勻速推注藥液，推注速度≤0.2ml/10g體重，單次最大給藥劑量不超過1ml/20g體重；⑥注射完畢后快速拔出針頭，用消毒棉球按壓進針部位10秒止血。（2）注意事項：①進針深度不宜過深，避免刺傷肝臟、膀胱、腸道等臟器；②藥液需預熱至37℃，避免冷應激導致動物不良反應；③具有刺激性的藥液需調整pH至中性，避免引發腹腔炎癥；④注射后觀察小鼠3-5分鐘，確認無異常后放回飼養籠。（得分要點：操作步驟準確4分，注意事項2分，共6分）2.實驗動物倫理審查核心內容：（1）實驗必要性審查：確認實驗項目具有科學或社會價值，無替代方案可實現同等研究目標，符合3R原則要求；（2）實驗動物選擇審查：確認動物品系、等級、性別、周齡、數量選擇合理，動物使用量為滿足統計效力的最小值，無不必要的動物浪費；（3）操作方案審查：確認實驗操作流程經過優化，涉及疼痛、創傷的操作采取了麻醉、鎮痛措施，將動物痛苦降至最低；（4）福利保障審查：確認飼養環境符合對應等級動物的國標要求，提供充足的飼料、飲水和環境豐容，滿足動物福利五大自由要求；（5）安樂死方案審查：確認實驗結束后采用人道、合規的安樂死方法，避免動物遭受不必要的痛苦；（6）人員與安全審查：確認操作人員經過實驗動物技能培訓并取得相應資質，生物安全防控措施完善，無人員感染、環境污染風險；（7）廢棄物處置審查：確認實驗產生的動物尸體、組織、污染物等處置方案符合生物安全和危廢管理要求。（得分要點：答出任意6項即可得滿分6分）3.小鼠眼眶靜脈叢采血操作流程及安全劑量：（1）操作流程：①操作人員穿戴無菌防護用品，在屏障環境超凈臺內操作；②將小鼠用異氟烷或七氟烷輕度麻醉，角膜反射存在但無疼痛反應；③左手固定小鼠頭部，拇指、食指輕輕按壓小鼠頸部兩側，阻斷靜脈回流使眶靜脈叢充血，眼球輕微突出；④右手持肝素化的玻璃毛細管，從小鼠內眼角與眼球之間的縫隙刺入，深度2-3mm，輕輕旋轉毛細管，待血液自然流出后接入采集管；⑤達到采血量后快速拔出毛細管，用無菌干棉球按壓眼部1-2分鐘止血，確認無出血后將小鼠放回清潔籠具，觀察30分鐘。（2）安全劑量要求：健康成年小鼠單次采血量不超過100-200μl，若需多次采血，兩次采血間隔不少于2周，單次最大采血量不得超過總血量的10%，避免失血過多導致動物死亡或健康損傷。（得分要點：操作流程4分，劑量要求2分，共6分）五、案例分析題（1）違規行為（共6分，答出任意6項即可得滿分）①未按規定提交實驗動物倫理審查申請，未獲得倫理批準擅自開展動物實驗，違反《實驗動物倫理審查指南》《實驗動物管理條例》要求；②從無實驗動物生產許可證的商戶購買實驗動物，且動物無質量合格證明、等級不明，違反實驗動物采購管理規定；③在未取得實驗動物使用許可證的普通實驗室開展動物實驗，不符合實驗動物設施管理要求，存在生物安全風險；④實驗過程中未對創傷性操作采取麻醉、鎮痛措施，嚴重違反實驗動物福利要求，對動物造成不必要的痛苦；⑤實驗結束后采用摔死的非人道方法處死小鼠，不符合安樂死操作規范；⑥將動物尸體隨意混入普通生活垃圾丟棄，未按規定進行無害化處置，違反生物安全和危廢管理規定，存在病原擴散、環境污染風險；⑦未建立實驗動物使用記錄、操作記錄，不符合實驗動物溯源管理要求。（2）合規操作流程（共6分）①實驗前編制完整的實驗方案，明確動物使用數量、操作流程、鎮痛麻醉方案、安樂死方案、廢棄物處置方案，提交單位實驗動物倫理委員會審查，獲得倫理批準后方可啟動實驗；②從具備實驗動物生產許可證的正規供應商采購符合實驗要求等級