DB23∕T 3096-2022 水稻稻瘟病抗譜鑒定技術(shù)規(guī)程

ICS65.020.20

CCSB16DB23

黑龍江省地方標(biāo)準(zhǔn)

DB23/T3096-2022

水稻稻瘟病抗譜鑒定技術(shù)規(guī)程

2022-01-29發(fā)布2022-02-28實施

黑龍江省市場監(jiān)督管理局發(fā)布

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前??言

本文件按照GB/T1?.1?-2020?《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1?部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的

規(guī)定起草。

請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。

本文件由黑龍江省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出。

本文件起草單位：黑龍江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)研究所。

本文件主要起草人：張國民、馬軍韜、鄧凌韋、趙文生、宋顯東、彭友良、王春榮、司兆勝、

胡亞軍、王永力、張齊鳳、高洪儒、張君、王南博、任洋。

I

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水稻稻瘟病抗譜鑒定技術(shù)規(guī)程

1范圍

本文件規(guī)定了水稻稻瘟病抗譜鑒定技術(shù)的環(huán)境條件、鑒定方法、評價標(biāo)準(zhǔn)和技術(shù)檔案。

本文件適用于水稻品種的抗譜鑒定。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用

性文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改

單）適用于本文件。

本文件沒有規(guī)范性引用文件。

3術(shù)語與定義

本文件沒有規(guī)定的術(shù)語與定義。

4環(huán)境條件

鑒定時的環(huán)境條件，溫度、相對濕度和光照條件必須可控，溫度范圍26?℃~28?℃，相對濕度100?%，

具有遮光和加光設(shè)備。

5鑒定方法

5.1水稻苗的種植與管理

5.1.1水稻品種的選擇

選擇主栽或高潛力水稻品種10?份~15?份用于試驗。同時，選擇稻瘟病發(fā)生較重地塊，種植普感

品種麗江新團黑谷或蒙古稻，用于采集、分離當(dāng)?shù)氐疚敛【辍?/p>

5.1.2浸種催芽

水稻種子裝入紗網(wǎng)袋，在11?℃~12?℃的清水中浸種6?d~8?d。浸種完成后，32?℃進行破胸處理，

然后在25?℃~28?℃條件下，催芽24?h~36?h。

5.1.3播種

選取發(fā)芽一致的種子穴播于128?孔塑料育秧盤內(nèi)（54?cm×28?cm×4?cm），每孔播種4??；??粒，

3?次重復(fù)，播種后將育秧盤置于溫室苗床上，其上覆蓋約1?cm厚的干細(xì)土。

5.1.4水稻苗管理

1

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水稻苗全程不施用任何殺菌劑，其他按常規(guī)管理。

5.2接種體制備

將稻瘟病菌點接于番茄燕麥平板培養(yǎng)基上，26?℃~28?℃培養(yǎng)至菌落直徑接近培養(yǎng)基邊緣，加入

無菌水洗脫菌絲和分生孢子，將其涂布于另一平板培養(yǎng)基上，超凈工作臺內(nèi)吹干后，26?℃~28?℃光

照培養(yǎng)至表面產(chǎn)生一層氣生菌絲。用無菌水將氣生菌絲和分生孢子沖洗干凈，晾干后罩上2?層紗布，

26?℃~28?℃光照培養(yǎng)至大量分生孢子產(chǎn)生。用含0.025?%Tween?20的無菌水洗脫分生孢子，過濾后

5

將其濃度調(diào)至3×10?個孢子/mL，現(xiàn)用現(xiàn)配，從配制到完成接種不得超過2?h。

5.3人工接種流程

5.3.1離體葉片準(zhǔn)備

在水稻苗中選取5?葉期充分展開的心葉，剪成長約5?cm、上下寬度基本一致的葉段，每個品種

從不同植株選取3?個葉段作為三次重復(fù)。用滅菌昆蟲針在葉片正面、垂直于葉脈方向輕輕劃出微創(chuàng)

點，每個葉段3?點，每點長2?mm~5?mm。將兩層滅菌濾紙片平鋪于直徑9?cm的培養(yǎng)皿內(nèi)，加無菌水浸

濕，表面無明水。將滅菌牙簽放入滅菌水浸泡10?min~20?min，取兩根滅菌牙簽放在浸濕的濾紙片表

面，將已劃出微創(chuàng)點的葉段擺放其上。用0.025?%Tween20?水溶液對葉段均勻噴霧，培養(yǎng)皿蓋內(nèi)側(cè)

同時噴霧。

5.3.2人工接種

用微量移液器吸取分生孢子懸浮液點接于葉段的微創(chuàng)點，每個微創(chuàng)點接分生孢子懸浮液

5?μL~10?μL，蓋上培養(yǎng)皿蓋。將接種后的葉段在26?℃~28?℃、相對濕度100?%和完全黑暗條件下培養(yǎng)

24?h~30?h，然后在相同條件下轉(zhuǎn)至光照培養(yǎng)，直至發(fā)病。

5.4病情調(diào)查

5.4.1調(diào)查時間

在接種后3?d開始調(diào)查，連續(xù)調(diào)查5?d，每天上午、下午各調(diào)查一次。

5.4.2抗感反應(yīng)型調(diào)查標(biāo)準(zhǔn)

接種點部位無病斑或僅有很小的黑褐色壞死斑，不產(chǎn)生分生孢子，記為抗病反應(yīng)型；接種點部

位病斑較大，呈梭形，中心有灰色的崩潰部，可以產(chǎn)生菌絲和分生孢子，崩潰部邊緣可能有褐色壞

死，最外層為黃色的中毒部，形狀不規(guī)則，記為感病反應(yīng)型。

5.4.3調(diào)查方法

每個水稻品種接種后的9個接種點全部調(diào)查，將抗感反應(yīng)結(jié)果記入表A.1。

6評價標(biāo)準(zhǔn)

6.1接種有效性評價標(biāo)準(zhǔn)

每次接種均以普感品種麗江新團黑谷為對照，對照表現(xiàn)為典型的感病反應(yīng)型時，視為接種有效。

6.2重復(fù)性接種判定標(biāo)準(zhǔn)

2

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在第一次接種后，供試菌株表現(xiàn)為抗病反應(yīng)型或者不能準(zhǔn)確判定其反應(yīng)型，需要進行第二次和

第三次接種，只要其中一次表現(xiàn)為感病反應(yīng)型，則記為感病反應(yīng)型，否則記為抗病反應(yīng)型。

6.3供試菌株數(shù)量標(biāo)準(zhǔn)

室內(nèi)鑒定水稻品種的抗瘟性，供試菌株必須為單孢菌株，且必須從適宜種植區(qū)內(nèi)種植的普感品

種麗江新團黑谷或蒙古稻上分離獲得。建議每個縣（市）菌株數(shù)量不少于300?株，或者連續(xù)3?年、每

年不少于100?株。

6.4抗瘟性評價標(biāo)準(zhǔn)

依據(jù)各縣或縣級市水稻品種室內(nèi)抗譜的高低評價其在當(dāng)?shù)靥镩g抗瘟性的優(yōu)劣，評價標(biāo)準(zhǔn)見表

A.2。

7技術(shù)檔案

建立水稻稻瘟病抗譜鑒定技術(shù)檔案，內(nèi)容包括環(huán)境條件、鑒定方法、評價標(biāo)準(zhǔn)及試驗數(shù)據(jù)等。

3

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附錄A

資料性附錄

水稻稻瘟病抗譜調(diào)查

A.1水稻稻瘟病抗譜調(diào)查見表A.1和A.2。

表A.1供試菌株抗感反應(yīng)型調(diào)查記錄表

調(diào)查時間：水稻品種名稱：生育期：

供試菌株編號供試菌株名稱反應(yīng)型

1

2

3

4

5

6

表A.2水稻品種田間抗瘟性評價標(biāo)準(zhǔn)

田間抗瘟性評價抗譜評價標(biāo)準(zhǔn)

抗病Resistant（R）抗譜≥70?%

中抗Moderatelyresistant（MR）50?%≤抗譜＜70?%

中感ModeratelySusceptible（MS）30?%≤抗譜＜50?%

感病Susceptible（S）抗譜＜30?%

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