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文檔簡介
實驗一
動物細胞制片技術及減數分裂觀察一、實驗目的
1、了解動物生殖細胞的形成過程,觀察減數分裂過程中染色體的動態變化;
2、學習并掌握制片和染色技術。
二、實驗原理
減數分裂是一種特殊方式的細胞分裂,僅在配子形成過程中發生。這一過程的特點:
1、連續進行兩次核分裂,而染色體只復制一次,結果形成四個核,每個核只含單倍體數的染色體,即染色體數減少一半,所以稱為減數分裂;
2、前期特別長,而且變化復雜,包括同源染色體的配對、交換與分離。整個減數分裂過程可分為下列幾個時期:減數第一次分裂
前期Ι
細線期:第一次分裂開始,染色質濃縮為幾條細而長的細線。每一條染色體已復制為二個單體,但在顯微鏡下仍看不出染色體的雙重性。(減數I前期-----細線期)偶線期:染色體形態與細線期沒有多大差別,同源染色體開始配對(聯會),出現聯會復合體。(減數Ι前期-----偶線期)粗線期:同源染色體配對完畢,稱雙價體,每個雙價體含有四個染色單體(四分體)。染色體繼續變短變粗。(減數Ι前期-----粗線期)雙線期:配對的同源染色體開始分開。由于非姊妹染色單體間發生過交換,因此有交叉現象。交叉數減少,交叉向染色體端部移動(交叉端化),染色體螺旋化程度加深。(減數Ι前期----雙線期)
濃縮期:又稱終變期,仍為n個雙價體,染色體變得更短粗。核仁核膜消失。(減數Ι前期-----濃縮期)中期Ι
:各個雙價體排列在赤道板上,紡錘體形成,兩個同源染色體上的著絲粒逐漸遠離。雙價體開始分離。染色體仍為2n,每一染色體含有兩個染色單體。(減數Ι-----中期)后期Ι:兩條同源染色體分開,分別移向兩極。每一條染色體有一著絲粒,帶著兩個染色單體。每一極得到n條染色體。染色體數目減半。(減數Ι-----后期)末期Ι:染色體解旋,又呈絲狀,核膜形成,胞質分裂,成為二個子細胞。(減數Ι-----末期)間期:在減數第二次分裂開始以前,兩個子細胞進入間期。但有的植物如延齡草和大多數動物不經過末期和間期,直接進入減數第二次分裂的晚前期。(間期)前期
Ⅱ
:染色體縮短變粗,染色體開始清晰起來。每個染色體含有一個著絲粒和縱向排列的兩條染色單體。(減數Ⅱ-----前期)中期Ⅱ:染色體排列在赤道面上,每個染色體有一個著絲粒,兩條染色單體開始分離。此時細胞的染色體數為n,每條染色體有兩條染色單體。(減數Ⅱ-----中期)減數第二次分裂后期Ⅱ:
兩條染色單體分離,移向兩極,每極含n條染色體。(減數Ⅱ-----后期)末期Ⅱ:
染色體逐漸解螺旋,變為細絲狀,核膜重建,核仁重新形成。胞質分裂,各成為兩個子細胞。(減數Ⅱ-----末期)
減數分裂模式圖
減數分裂結果:
一個細胞經減數分裂形成四個子細胞,每個子細胞中有n個染色體。因為細胞分裂兩次,染色體只復制一次。三、實驗材料短角斑腿蝗(Catantops
brachycerus)精巢四、實驗儀器和試劑
儀器:冰箱,顯微鏡試劑:Carnoy固定液,1NHCL,70%乙醇,改良苯酚品紅染液
五、實驗步驟
1、采集蝗蟲:
隨蝗蟲物種的不同,采集時間有變化。
采集方法可用手抓或用網捕捉。如短角斑腿蝗喜溫暖,可在十月左右,在晴天陽光下的草地用掃網捕捉。
2、取材固定:
用鑷子夾住雄蟲尾部,向外拉。可見到一團黃色組織塊,這就是蝗蟲的精巢。剔除精巢上的其他組織,將其放到Carnoy
固定液中固定1.5-2小時,再放入70%酒精溶液中。
3、剝曲精細管:切取較粗端,約占全長的1/3-1/2(粗端遠離輸精管,細胞分裂旺盛,細端近輸精管,多已經生成精子),棄細端,蒸餾水沖洗,吸干水分。
4、1MHCL解離2-5分鐘,蒸餾水多次沖洗(因為HCL影響染色)。
5、將材料放在載片上,滴一滴改良苯酚品紅,染15-20分鐘。
6、壓片:在材料上加蓋玻片,吸去多余染液,上覆吸水紙,用拇指壓蓋玻片。
7、鏡下觀察。
六.實驗結果繪制觀察到的減數分裂各時期、尤其是前期Ι各個時期染色體的變化圖。
七.實驗分析與討論
1、分析此次實驗成敗的原因。
2、本次實驗有哪些地方可以改進?
八.思考題
1、減數分裂的遺傳學意義。
2、減數的機理是什么?
3、交叉和交換的關系。
九.參考文獻
1.劉祖洞,江紹慧,《遺傳學》,人民教育出版社,北京2.遺傳學實驗高等教育出版社3.遺傳學實驗方法和技術高等教育出版社附圖減數Ι前期----細線期減數Ι前期----偶線期減數Ι前期----粗線期減數Ι前期----雙線期減數Ι前期-----濃縮期(終變期)減數Ι-----中期減數Ι-----后期減數Ι-----末期間期減數Ⅱ-----前期減數Ⅱ-----中期減數Ⅱ-----后期減數Ⅱ-----末期減數Ι前期—細線期偶線期
粗線期雙線期
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