團體標準 康養植物芬多精的測定 直接熱脫附-氣質聯用法

團體標準康養植物芬多精的測定直接熱脫附-氣質聯用法ICS65.020.20CCSB61XX省（自治區/直轄市）花卉協會發布2026年3月1日發布2026年6月1日實施前言本文件按照GB/T1.1-2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規則》要求撰寫。本文件由XX花卉研究院、XX康養園藝有限公司、XX農業大學園藝學院提出。本文件歸口于XX省（自治區/直轄市）花卉協會。本項目任務來源于XX康養植物產業標準化專項計劃。本文件起草單位：XX花卉研究院、XX康養園藝有限公司、XX農業大學園藝學院、XX城市綠化管理處、XX環境檢測有限公司。本文件起草人：張XX、李XX、王XX、趙XX、劉XX、陳XX、楊XX、周XX、吳XX、鄭XX。本文件為首次發布。引言芬多精是康養植物（如松、柏、樟、竹類等）通過葉片、莖干等器官釋放的揮發性有機化合物（主要為萜類、芳香族化合物等），具有抑菌、抗病毒、凈化空氣、舒緩情緒、改善人體生理狀態等康養功效，是康養植物核心價值的重要體現。目前，康養植物芬多精的測定方法多樣，包括溶劑萃取法、頂空進樣法、熱脫附法等，其中直接熱脫附-氣質聯用法（TD-GC-MS）具有樣品無需前處理、無溶劑污染、富集效率高、檢測靈敏度高、能同時定性定量多種芬多精組分等優勢，已成為揮發性有機物測定的主流方法之一。當前我國尚無統一的康養植物芬多精測定團體標準，不同檢測機構采用的檢測條件、操作流程、定性定量方法不一致，導致檢測結果可比性差、準確性參差不齊，難以滿足康養植物產業規模化發展、產品質量管控及市場監管的需求。為規范康養植物芬多精的測定方法，明確直接熱脫附-氣質聯用法的操作要求，確保檢測結果的科學性、準確性、可比性和重復性，結合我國康養植物資源特點、檢測技術發展現狀及產業需求，經文獻檢索、試驗研究、專家咨詢、論證修訂，制定本標準。本標準的制定遵循科學性、實用性、規范性、創新性原則，明確了直接熱脫附-氣質聯用法測定康養植物芬多精的術語定義、原理、試劑與材料、儀器設備、樣品采集與制備、檢測步驟、結果計算與表示、精密度與準確度、質量控制、檢測報告等內容，適用于各類康養植物（含活體植株、葉片、枝條及相關康養產品原料）中芬多精的定性鑒定和定量測定，可供花卉培育企業、康養機構、環境檢測機構、科研單位及相關技術人員使用。本標準研制過程中，課題組開展了不同熱脫附條件、色譜條件、質譜條件的優化試驗，驗證了方法的精密度、準確度和檢出限，收集整理了國內外相關技術資料，廣泛征求康養植物培育、環境檢測、園藝科研等領域專家及生產一線技術人員的意見，優化完善檢測方案，確保標準內容貼合實際檢測需求、具有較強的可操作性和指導性。課題資金來源于XX康養植物產業標準化專項計劃，課題組成員不存在利益沖突。1范圍本標準規定了康養植物芬多精測定的術語和定義、原理、試劑與材料、儀器設備、樣品采集與制備、檢測步驟、結果計算與表示、精密度與準確度、質量控制、檢測報告等技術要求。本標準適用于各類康養植物活體植株、新鮮葉片、新鮮枝條中芬多精的定性鑒定和定量測定，也適用于以康養植物為原料的初級加工產品（如干燥葉片、枝條切片）中芬多精的測定，其他同類康養植物及相關產品可參照本標準執行。本標準不適用于康養植物深加工產品（如精油、提取物）中芬多精的測定，此類產品的測定可另行制定專項標準。2規范性引用文件本標準引用下列文件，其最新版本（包括所有修改單）適用于本文件。1.GB/T1.1-2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規則》2.GB/T6682-2008分析實驗室用水規格和試驗方法3.GB/T27404-2008實驗室質量控制規范食品理化檢測4.GB/T3095-2012環境空氣質量標準5.NY/T1107花卉種苗6.HJ644-2013環境空氣揮發性有機物的測定吸附管采樣-熱脫附/氣相色譜-質譜法3術語和定義下列術語和定義適用于本標準。3.1康養植物具有釋放芬多精、負離子等有益物質，能改善環境質量、舒緩人體情緒、促進人體身心健康，可應用于康養產業、城市綠化、庭院景觀等場景的植物種類，主要包括松科、柏科、樟科、竹亞科等植物。3.2芬多精康養植物通過葉片、莖干、樹皮等器官自然釋放的揮發性有機化合物的總稱，主要成分為單萜類（如α-蒎烯、β-蒎烯、檸檬烯）、倍半萜類（如石竹烯、雪松烯）及少量芳香族化合物，具有抑菌、抗炎、舒緩情緒等生理活性。3.3直接熱脫附（TD）將樣品直接放入熱脫附裝置中，通過程序升溫使樣品中揮發性芬多精組分脫附，經載氣攜帶進入氣相色譜-質譜聯用儀進行檢測的前處理方法，無需添加溶劑，可實現樣品中芬多精的快速富集和脫附。3.4氣相色譜-質譜聯用（GC-MS）將氣相色譜的分離能力與質譜的定性定量能力相結合的分析技術，可實現復雜混合物中各組分的分離、定性鑒定和定量測定，適用于芬多精這類多組分揮發性有機物的檢測。3.5檢出限（LOD）在規定的檢測條件下，樣品中芬多精組分能被檢出的最低濃度，以信噪比（S/N）≥3時對應的濃度表示。3.6定量限（LOQ）在規定的檢測條件下，樣品中芬多精組分能被準確定量測定的最低濃度，以信噪比（S/N）≥10時對應的濃度表示。4原理選取代表性康養植物樣品（葉片、枝條或活體植株局部），置于熱脫附樣品池中，通過直接熱脫附裝置進行程序升溫，使樣品中揮發性芬多精組分快速脫附；脫附后的芬多精組分經惰性載氣攜帶，進入氣相色譜儀，通過毛細管色譜柱實現各組分的分離；分離后的各組分依次進入質譜儀，在電子轟擊離子源（EI）作用下離子化，產生特征質譜圖；通過與標準質譜庫比對進行定性鑒定，采用外標法進行定量測定，計算樣品中各芬多精組分的含量。5試劑與材料5.1試劑5.1.1標準品：α-蒎烯（純度≥98%）、β-蒎烯（純度≥98%）、檸檬烯（純度≥98%）、石竹烯（純度≥98%）、雪松烯（純度≥98%）等常見芬多精標準品，可根據檢測需求選用其他相關標準品。5.1.2溶劑：色譜純正己烷、甲醇，純度≥99.9%，無揮發性雜質干擾。5.1.3載氣：氦氣（He），純度≥99.999%；氮氣（N?），純度≥99.999%，用于儀器吹掃和保護。5.1.4實驗室用水：符合GB/T6682-2008規定的一級水，無揮發性雜質。5.2材料5.2.1樣品容器：玻璃密封瓶（50mL、100mL），帶聚四氟乙烯密封蓋，使用前用甲醇浸泡30min，晾干后備用，避免污染。5.2.2采樣工具：不銹鋼剪刀、鑷子、采樣袋（鋁箔袋或聚四氟乙烯采樣袋），使用前用氮氣吹掃3~5min，去除殘留揮發性雜質。5.2.3熱脫附樣品池：石英材質或不銹鋼材質，容積5~20mL，使用前用甲醇清洗，氮氣吹干，避免殘留雜質干擾檢測。5.2.4濾膜：有機相濾膜（孔徑0.22μm），用于過濾標準溶液，去除雜質。6儀器設備6.1直接熱脫附裝置：具備程序升溫功能，脫附溫度范圍50~400℃，控溫精度±1℃；可調節載氣流速（0~100mL/min），具備分流/不分流進樣功能，分流比可調節（0~100:1）。6.2氣相色譜-質譜聯用儀：氣相色譜部分具備程序升溫功能，柱溫范圍-60~400℃，控溫精度±0.1℃；配備毛細管色譜柱（推薦DB-5MS或HP-5MS，30m×0.25mm×0.25μm，固定相為5%苯基-95%甲基聚硅氧烷）；質譜部分具備電子轟擊離子源（EI），離子源溫度200~300℃，質量掃描范圍m/z30~500amu，分辨率≥1000，具備質譜庫檢索功能（推薦NIST質譜庫）。6.3分析天平：精度0.1mg，符合JJG1036-2008《電子天平檢定規程》要求，定期校準。6.4采樣設備：便攜式采樣箱（帶冷藏功能，溫度0~4℃），用于樣品采集后低溫保存；氮氣吹掃儀，用于采樣工具和樣品容器的吹掃。6.5樣品處理設備：超聲波清洗器（功率200~500W，頻率40kHz），用于標準品溶解和容器清洗；離心機（轉速≥5000r/min），用于標準溶液的澄清處理。6.6其他設備：干燥器（內置變色硅膠）、移液管（1mL、5mL、10mL，精度±0.01mL）、容量瓶（10mL、50mL、100mL），所有玻璃量器均符合JJG196-2006《常用玻璃量器檢定規程》要求，定期校準。7樣品采集與制備7.1樣品采集7.1.1采樣原則：遵循“隨機、均勻、代表性”原則，根據康養植物的種類、生長狀態、種植密度，確定采樣點位和采樣數量，確保采集的樣品能真實反映該批次或該區域康養植物芬多精的釋放水平。7.1.2采樣時間：選擇晴朗、無風或微風天氣，采樣時間為上午9:00~11:00（此時植物芬多精釋放量相對穩定），避免雨天、高溫（≥35℃）、嚴寒（≤5℃）及大風天氣采樣。7.1.3采樣方法：①活體植株采樣：選取生長健壯、無病蟲害、長勢均勻的康養植物，在植株中上部（距地面1.5~2.0m）隨機采集3~5個新鮮葉片或枝條樣品，每個樣品質量不少于5g，用采樣袋密封，做好采樣標記（樣品名稱、采樣時間、采樣地點、采樣人）。②離體樣品采樣：對于已采摘的新鮮葉片、枝條，在采摘后1h內完成采樣，隨機選取無損傷、無枯萎的樣品，每個樣品質量不少于5g，放入玻璃密封瓶中，密封保存，做好標記。7.1.4采樣數量：每批次或每區域采樣不少于3個平行樣品，同時采集空白樣品（采樣袋或玻璃密封瓶，不裝入任何樣品），用于空白對照檢測。7.1.5樣品保存：采樣后，將樣品立即放入便攜式冷藏采樣箱（0~4℃）中保存，避免陽光直射和高溫環境；樣品采集后24h內完成檢測，若無法及時檢測，可在-20℃冰箱中冷凍保存，保存時間不超過72h，解凍后立即檢測，解凍過程中避免樣品反復凍融。7.2樣品制備7.2.1樣品預處理：將采集的新鮮樣品取出，用干凈的濾紙輕輕擦拭表面灰塵和雜質，去除枯萎、破損部分，避免樣品污染；若為枝條樣品，用不銹鋼剪刀剪成0.5~1.0cm的小段；若為葉片樣品，可根據熱脫附樣品池大小，剪成合適尺寸（直徑0.5~1.0cm），避免樣品過大無法放入樣品池。7.2.2樣品稱量：用分析天平準確稱量2.000g預處理后的樣品，放入熱脫附樣品池中，輕輕壓實（避免過度壓實影響芬多精脫附），立即密封樣品池，做好樣品標記，待檢測。7.2.3空白樣品制備：取空的熱脫附樣品池，不放入任何樣品，密封后作為空白樣品，與實際樣品同步檢測，用于扣除空白干擾。8檢測步驟8.1儀器調試8.1.1直接熱脫附裝置調試：開啟熱脫附裝置，預熱30min，設定脫附條件（推薦條件）：脫附溫度200~250℃，脫附時間5~10min，載氣流速（氦氣）30~50mL/min，分流比10:1~20:1，傳輸線溫度220~250℃，避免芬多精組分在傳輸線中冷凝。8.1.2氣相色譜-質譜聯用儀調試：開啟氣相色譜-質譜聯用儀，預熱60min，設定色譜條件和質譜條件（推薦條件）：①色譜條件：毛細管色譜柱DB-5MS（30m×0.25mm×0.25μm）；柱溫程序：初始溫度40℃，保持3min，以5℃/min升溫至150℃，保持2min，再以10℃/min升溫至250℃，保持5min；載氣（氦氣）流速1.0~1.5mL/min，恒流模式；進樣口溫度250℃，分流進樣，分流比與熱脫附裝置一致；進樣量：脫附氣體全部進入色譜柱。②質譜條件：電子轟擊離子源（EI），離子源溫度230℃；電子能量70eV；檢測器電壓1.0~1.2kV；質量掃描范圍m/z30~500amu；掃描方式：全掃描（定性）和選擇離子掃描（SIM，定量）；溶劑延遲時間3~5min，避免溶劑峰干擾檢測。8.1.3儀器性能驗證：調試完成后，注入1.0μg/mL的芬多精混合標準溶液，進行儀器性能測試，要求各組分分離度≥1.5，峰形對稱（對稱因子0.9~1.1），質譜響應值穩定，RSD≤5%，方可進行樣品檢測。8.2標準曲線的繪制8.2.1標準儲備液的配制：準確稱取各芬多精標準品（α-蒎烯、β-蒎烯等）10.0mg，分別置于10mL容量瓶中，用色譜純正己烷溶解并定容至刻度，搖勻，得到濃度為1000μg/mL的標準儲備液，置于-20℃冰箱中密封保存，保存時間不超過1個月。8.2.2標準工作溶液的配制：取標準儲備液，用色譜純正己烷逐級稀釋，配制濃度為0.1μg/mL、0.5μg/mL、1.0μg/mL、5.0μg/mL、10.0μg/mL的系列標準工作溶液，搖勻，現配現用；配制過程中，使用移液管準確移取，避免稀釋誤差。8.2.3標準曲線的測定：將系列標準工作溶液分別注入熱脫附樣品池中，按照8.1設定的儀器條件進行檢測，以各芬多精組分的峰面積為縱坐標（y），以標準工作溶液的濃度為橫坐標（x，μg/mL），繪制標準曲線，計算回歸方程和相關系數（r）。要求相關系數r≥0.999，否則重新配制標準溶液并繪制標準曲線。8.3樣品測定8.3.1將制備好的樣品池（含樣品）和空白樣品池，按照熱脫附裝置的操作要求放入樣品位，按照8.1設定的儀器條件進行檢測，每個樣品平行測定3次，記錄各芬多精組分的峰面積。8.3.2檢測過程中，每隔10個樣品，插入1個中間濃度（1.0μg/mL）的標準工作溶液進行質量控制，若標準溶液的峰面積與標準曲線中對應濃度的峰面積偏差≤10%，繼續檢測；若偏差>10%，停止檢測，重新調試儀器并校準標準曲線后，再繼續檢測。8.3.3若樣品中某芬多精組分的峰面積超出標準曲線的線性范圍，需將樣品適當稀釋（用色譜純正己烷稀釋）后，重新測定，確保測定結果在標準曲線線性范圍內。8.4定性鑒定將樣品檢測得到的質譜圖，與NIST標準質譜庫進行比對，結合色譜保留時間進行定性鑒定：若樣品中某組分的質譜圖與標準質譜庫中某芬多精標準品的質譜圖相似度≥90%，且其保留時間與該標準品在相同檢測條件下的保留時間偏差≤±0.05min，則可確認該組分為對應的芬多精。9結果計算與表示9.1結果計算樣品中某芬多精組分的含量（以質量分數計，mg/kg），按下列公式計算：X=式中：X——樣品中某芬多精組分的含量，單位為毫克每千克（mg/kg）；C——由標準曲線計算得到的樣品測定液中該芬多精組分的濃度，單位為微克每毫升（μg/mL）；C?——空白樣品測定液中該芬多精組分的濃度，單位為微克每毫升（μg/mL）；V——樣品測定液的體積，單位為毫升（mL）；若樣品未稀釋，V=1；若樣品經稀釋，V為稀釋后樣品測定液的體積，單位為mL；f——樣品的稀釋倍數；若樣品未稀釋，f=1；若樣品經稀釋，f為稀釋倍數（如取1mL樣品定容至10mL，f=10）；m——樣品的取樣質量，單位為克（g）；計算結果保留三位有效數字，若含量低于檢出限，按“未檢出”表示；若含量高于檢出限但低于定量限，需注明“檢出但未定量”。9.1.2平行樣品結果計算：3個平行樣品的測定結果，計算平均值作為最終測定結果，平行樣品的相對標準偏差（RSD）應符合本標準10.1的要求，否則需重新測定。9.2結果表示9.2.1定性結果：列出樣品中檢出的各芬多精組分名稱、保留時間、質譜相似度。9.2.2定量結果：列出樣品中各芬多精組分的含量（mg/kg）、平行樣品平均值、相對標準偏差（RSD）；未檢出的組分，標注“未檢出（LOD：××μg/kg）”；檢出但未定量的組分，標注“檢出但未定量（LOQ：××μg/kg）”。9.2.3總芬多精含量：若需要表示樣品中總芬多精含量，可將檢出的各芬多精組分的含量相加，計算總和，保留三位有效數字。10精密度與準確度10.1精密度同一實驗室，由同一操作人員，使用同一臺儀器，對同一康養植物樣品（或加標樣品）進行6次平行測定，各芬多精組分測定結果的相對標準偏差（RSD）應符合下列要求：①含量≥10.0mg/kg時，RSD≤5%；②0.1mg/kg≤含量<10.0mg/kg時，RSD≤10%；③含量<0.1mg/kg時，RSD≤15%。10.2準確度采用加標回收試驗驗證方法的準確度，選取空白樣品或已知含量的康養植物樣品，加入不同濃度的芬多精標準品，進行加標回收測定，加標回收率應符合下列要求：①含量≥10.0mg/kg時，加標回收率為85%~115%；②0.1mg/kg≤含量<10.0mg/kg時，加標回收率為80%~120%；③含量<0.1mg/kg時，加標回收率為75%~125%。加標回收試驗每個濃度水平平行測定3次，計算平均加標回收率和相對標準偏差。11質量控制11.1試劑與材料質量控制：所有試劑均應符合本標準5.1的要求，標準品應具有證書，純度符合規定；樣品容器、采樣工具使用前需進行清潔和吹掃，避免污染；熱脫附樣品池使用前需進行清洗和干燥，確保無殘留雜質。11.2儀器質量控制：儀器每次使用前需進行調試和性能驗證，確保儀器運行正常；定期對儀器進行校準（分析天平、移液管、容量瓶、氣相色譜-質譜聯用儀等），校準記錄存檔備查；檢測過程中，定期插入中間濃度標準溶液進行質量控制，及時發現和糾正儀器偏差。11.3樣品質量控制：樣品采集應遵循“隨機、均勻、代表性”原則，做好采樣記錄；樣品保存應符合本標準7.1.5的要求，避免樣品變質和芬多精組分流失；樣品制備過程中，嚴格控制取樣質量和操作步驟，避免樣品污染和損失；每個樣品至少測定3個平行樣品，平行樣品相對標準偏差應符合本標準10.1的要求。11.4空白控制：每次檢測均應設置空白樣品（采樣空白、試劑空白、儀器空白），空白樣品中若檢出芬多精組分，需排查污染來源（試劑、容器、儀器、環境等），消除污染后重新檢測；若無法消除污染，需注明檢測結果受污染影響。11.5人員控制：檢測人員應經過專業培訓，熟悉本標準的操作流程和儀器使用方法，具備相應的檢測資質；檢測過程中，嚴格按照本標準的要求操作，做好檢測記錄，確保檢測數據的真實性和可追溯性。12檢測報告檢測報告應包含下列內容，格式規范、信息完整、數據真實，簽字蓋章后生效：12.1基本信息：報告編號、檢測機構名稱、檢測日期、委托單位名稱、樣品名稱、樣品編號、采樣時間、采樣地點、樣品狀態（新鮮/冷凍/干燥）、樣品數量。12.2檢測依據：本標準編號及名稱（T/XXXXXXX-2026《團體標準康養植物芬多精的測定直接熱脫附-氣質聯用法》）。12.3檢測條件：直接熱脫附條件、氣相色譜條件、質譜條件（可附儀器參數表）。12.4檢測結果：樣品中各芬多精組分的定性結果（組分名稱、保留時間、質譜相似度）、定量結果（含量、平行樣品平均值、RSD）、總芬多精含量（若有）；未檢出或檢出但未定量的組分，按本標準9.2.2的要求標注。12.5精密度與準確度：平行樣品相對標準偏差、加標回收率（若有）。12.6質量控制說明：空白樣品檢測結果、中間濃度標準溶液質量控制結果、儀器校準情況等。12.7檢測結論：根據檢測結果，給出樣品中芬多精的檢出情況和含量水平評價（若有）。12.8其他信息：檢測人員簽字、審核人員簽字、批準人員簽字、檢測機構蓋章、報告出具日期、備注（如樣品保存情況、稀釋情況等）。附錄A（資料性附錄）常見康養植物芬多精組分及特征離子表A.1常見康養植物芬多精組分及特征離子芬多精組分名稱分子式保留時間（min）（參考值）特征離子（m/z