CN118490849B 一種用于多模式成像和癌癥聯合免疫治療的納米診療制劑及其制備方法 （南開大學）

一種用于多模式成像和癌癥聯合免疫治療種用于多模式成像和癌癥聯合免疫治療的納米診療制劑及其制備方法，上述納米診療制劑包缺氧激活探針和血管破壞劑共同負載于金屬有2所述缺氧激活探針為基于N-氧化物結構制備的分子探針，所述N-氧2.一種用于多模式成像和癌癥聯合免疫治療的納米診療制劑的制備方法，其特征在3.如權利要求2所述的一種用于多模式成像和癌癥聯合免疫治療的納米診療制劑的制4.如權利要求2所述的一種用于多模式成像和癌癥聯合免疫治療的納米診療制劑的制3在癌癥的診斷和預后方面取得了很大的進展，但癌癥仍然是全球主要的公共衛生問題。因此，結合高效的綜合疾病診斷和治療策略對提高癌癥治療效果和總生存率至關重要。然而成像技術，具有高靈敏度和價格低廉，但在穿透深度和空間分辨率方面受到限制。光聲雙模式成像應用到腫瘤診斷中是一種引人矚目的策略。然而，腫瘤的NIR-IIFL/PA雙模式成像目前仍然面臨挑戰。首先，同時實現NIR-IIFL和PA信號的最大亮度是一項困難的任診斷的靈敏度和精確度。導癌細胞釋放大量腫瘤相關抗原（Tumor-associatedantigen,縮寫TAAs）和損傷相關分子模式（damage-associatedmolecularpattern，縮寫DAMPs這些抗原可促進樹突狀細胞（Dendriticcells，縮寫DC）成熟并有助于抗原呈遞給T細胞。除ICD外，模式識別受體具。環磷酸鳥苷-磷酸腺苷酸合成酶（cyclicguanosinemonophosphate-adenosinemonophosphatesynthase，縮寫cGAS)-干擾素基因刺激物(stimulatorofinterferongenes，縮寫STING)通路的激活可誘導I型干擾素和其他免疫介質的產生，增強先天性免疫4不足和耗氧加速之間的不平衡。這種動態變化導致了大多數實體瘤中普遍存在的缺氧狀血管破壞劑和金屬有機框架，所述缺氧激活探針和血管破壞劑共同負載于金屬有機框架物結構的分子探針可以在缺氧刺激下轉化為相應的胺化合物，分子結構由受體-受體構型5[0022]具體合成過程如下：鹵代N,N-二乙基苯胺衍生物與苯并雙噻二唑發生施蒂勒反[0025]將缺氧激活探針和血管破壞劑整合到一種酸響應性的金屬有機框架（Metal僅能夠抑制原發腫瘤的生長，而且通過引發強烈的免疫反應抑制4T1荷瘤小鼠體內的遠端腫瘤。[0026]當在納米診療制劑的金屬有機框架表面覆蓋免疫細胞膜后，特別是巨噬細胞膜瘤的靶向聚集，由于巨噬細胞上的α4β1整合素可以結合到癌細胞上的血管細胞黏附分子，[0034]圖6是本發明實驗例4提供的不同活性氧物質/氧化還原分子/金屬離子處理后BC@6細胞孵育BC@Z-M不同時間后近紅外一/二區熒光的變化圖，B為在常氧條件下4T1細胞孵育BC@Z-M不同時間后近紅外一/二區熒光變化，C為常氧/缺氧條件下對細胞層面的熒光數值[0039]圖11是本發明實驗例9提供的在缺氧/常氧條件下，對用不同配方處理24小時的[0040]圖12是本發明實驗例9提供的在缺氧條件下不同濃度BC@Z-M對4T1腫瘤細胞殺傷[0041]圖13是本發明實驗例9提供的在缺氧/常氧條件下，對用不同方式處理24小時的[0043]圖15是本發明實驗例10提供的不同物質處理4T1細胞的高遷移率族蛋白B1（High[0044]圖16是本發明實驗例10提供的不同物質處理4T1細胞內ATP和cGAS-STING通路激[0049]圖21是本發明實驗例12提供的荷瘤小鼠在注射BC@Z-M納米粒子后不同時間的[0050]圖22是本發明實驗例12提供的荷瘤小鼠在注射BC@Z-M納米粒子后不同時間的PAI7[0051]圖23是本發明實驗例13提供的為評估在4T1荷瘤小鼠中各種干預措施的治療效果[0053]圖25是本發明實驗例13提供的不同治療干預后腫瘤切片的CD31免疫熒光染色，[0054]圖26是本發明實驗例13提供的不同治療干預后腫瘤切片的CD31免疫熒光染色熒[0059]圖31是本發明實驗例13提供的腫瘤組織中細胞毒性T細胞激活的定量分析統計[0060]圖32是本發明實驗例14提供的雙側腫瘤模型中BC@Z-M介導的協同治療過程示意[0061]圖33是本發明實驗例14提供的雙側腫瘤不同治療后情況，其中，Primary為原位[0062]圖34是本發明實驗例14提供的不同治療干預后雙側瘤中細胞毒性T細胞浸潤的流[0063]圖35是本發明實驗例14提供的不同治療干預后腫瘤中細胞毒性T細胞浸潤的定量8因子和損傷相關分子模式（damageassociatedmolecularpatterns，DAMPs釋放的是一個由非免疫原性變為免疫原性而介導機體產生抗腫瘤狀細胞等免疫細胞，從而引發細胞內或腫瘤微環境中的抗病毒或抗腫瘤免疫反應。cGAS-9的鹵代烴在鈀催化下發生的交叉偶聯反應。反應一般在除水除氧溶劑及惰性環境中進行。等計量的Cu(I)或Mn(II)鹽可以提高反應的專一性及反應速率。氧氣會使鈀催化劑發生氧)2氣氛下，反應冷卻至-78℃,使用干冰-丙酮混合物，保持30分鐘，然后加入正丁基鋰（n-)4121.94,77.51,77.20,76.88,67.02,49.96,29.65,8.59。[0090]如圖3所示，HRMS(MALDI-TOF,m/z):[M+H]+calcd.forC26H28N6O2S2,[0102]實驗例4BC@Z-M在不同干擾離子/物質存在條件下近紅外二區熒光信號/光聲信[0105]透射電子顯微鏡(TransmissionElectronMicroscope，簡稱TEM)和動態光散射nm的球形結構。簡稱CYP450）的大鼠肝微粒體和還原型輔酶Ⅱ（nicotinamideadeninedinucleotide膜的包裹成功的讓巨噬細胞減少了對BC@Z-[0115]當CA4P和BN-O被封裝到酸響應性COF載體中時，它們的抗腫瘤作用在常氧條件下[0119]瀕死/死亡的腫瘤細胞可以釋放大量死亡相關模式分子或抗原，這些成分均可有33333協同傳遞和靶向釋放CA4P和BN-O可顯著提高小鼠存活率。[0125]對腫瘤組織進行免疫熒光染色發現血管破壞劑結合PDT/PTT治療可以有效抑制瘤腫瘤治療是通過在第7天全身給藥不同的制劑，然后在注射后24小時對原發腫瘤進行局部以對前述各實施例所記載的技術方案進行修改，或者對其中部分技術特征進行等同替換；