侵襲性真菌感染的實驗室檢查

侵襲性真菌感染的實驗室檢查條件致病酵母菌念珠菌屬白色念珠菌非白色念珠菌熱帶念珠菌光滑念珠菌克柔念珠菌近平滑念珠菌葡萄牙念珠菌非念珠菌屬隱球菌屬毛孢子菌屬酵母屬紅酵母屬重要醫學酵母菌分類絲狀真菌曲霉屬煙曲霉非煙曲霉屬黃曲霉黑曲霉土曲霉構巢曲霉非曲霉屬鐮刀菌屬尖孢鐮刀菌茄病鐮刀菌暗色孢霉鏈格孢霉屬雙極菌屬萬氏霉屬彎孢屬賽多孢屬尖端賽多孢多育賽多孢接合菌根霉屬毛霉屬根毛霉屬犁頭霉屬醫學重要的絲狀真菌分類白色念珠菌（Candidaalbicans)光滑念珠菌(C.glabrata)熱帶念珠菌(C.Tropicalis)近平滑念珠菌(C.Parapsilisis)克柔念珠菌(C.Krusei)煙曲霉(A.fumigatus)黃曲霉(A.flavus)臨床常見病原真菌真菌菌落形態真菌菌落形態真菌菌落形態區分念珠菌和絲狀真菌假菌絲和真菌絲的區別—曲霉菌菌絲分隔假菌絲血涂片革蘭染色馬內菲青霉菌的菌絲膿標本直接涂片革蘭染色接合菌菌絲表現念珠菌絲狀真菌發熱++++++++多發性關節炎++-血++-皮膚損害++-肝損害++罕見竇道-++呼吸系統++++中樞系統稀少++真菌感染的臨床表現形態學檢查顯微鏡檢查

（革蘭染色、KOH壓片，乳酸棉芬蘭染色）培養檢查-培養時間5-7天組織病理學特殊檢查血清學試驗（G實驗，GM實驗）分子生物學真菌感染的實驗室診斷方法念珠菌直接涂片結果解讀可見真菌孢子及假絲（念珠菌）可見真菌孢子未見假絲（念珠菌）找到真菌菌絲（絲狀真菌，如曲霉，毛霉）

是最簡單也是最實用的檢查方法陽性結果可以確定真菌感染，陰性結果亦不能排除診斷如果在無菌體液的直接鏡檢中發現有真菌成分常可確立深部真菌病的診斷；但一般在有菌部位則只有發現大量真菌菌絲方可作出診斷快速，常在1-2小時出結果經常是唯一的診斷依據真菌標本的直接鏡鑒曲霉菌形態學鑒定—煙曲霉菌落棉蘭染色煙曲霉鏡下圖棉蘭染色—黃曲霉棉蘭染色—黑曲霉棉蘭染色—構巢曲霉棉蘭染色—小孢根霉棉蘭染色—稻根霉棉蘭染色制片（1，3）-β-D葡聚糖（簡稱G實驗）：可特異性激活鱟變形細胞溶解產物中的G因子，引起裂解物的凝固，故稱G試驗。

可檢測多種致病真菌感染：念珠菌，曲霉菌，肺孢子菌，鐮刀菌，地霉，組織胞漿菌，毛孢子菌等。不能用于檢測隱球菌和接合菌的感染早期診斷：可先于臨床診斷4天臨床常見的真菌血清學診斷方法假陽性血液透析、腹膜透析（應用纖維素膜）某些抗腫瘤藥物的應用如香菇多糖和磺胺類藥物病人輸入白蛋白、球蛋白、脂肪乳、凝血因子某些細菌敗血癥（尤其是鏈球菌敗血癥）手術中使用棉紗，棉拭子對策：動態監測葡聚糖的變化假陰性:隱球菌具有厚壁胞膜，在免疫缺陷患者體內生長緩慢，導致試驗呈假陰性。假陽性假陰性診斷：侵襲性曲霉菌感染（IPA），對侵襲性曲霉病的診斷具有較高的靈敏度和特異度，尤其在骨髓移植和血液病等免疫抑制的患者中。檢測范圍：曲霉菌、青霉菌，擬青霉。鏈格孢。GM試驗應用哌拉西林/他唑巴坦、阿莫西林/克拉維酸。谷類食物和脂質甜點中的GM抗原。腸道中定值的曲霉釋放GM進入血液循環。假陽性侵襲性念珠菌病是導致危重病患者死亡的主要疾病之一，在美國及許多發達國家位居醫院血源性感染的第四位，許多權威人士估計由其導致的成人死亡率為15%-25%,新生兒和兒童死亡率為10%-15%。侵襲性曲霉病病死率達50%。抗真菌藥作用于真菌細胞的同時也容易對人體細胞產生毒性作用。臨床治療真菌感染的藥物有限、用藥劑量較大、療程長、因此不良反應較多、毒性較大，成為臨床應用抗真菌藥物的主要瓶頸。侵襲性真菌感染的流行病學侵襲性念珠菌病念珠菌血癥播散性念珠菌病心內膜和腦膜念珠菌病深部器官念珠菌病侵襲性念珠菌病的定義患者簡介：女性，37歲，農民，因“咳嗽，咳痰4天，加重伴喘憋1天，意識不清2小時”于2014年5月7日入院。當日下午即行支氣管鏡檢查，示氣管粘膜充血，水腫，糜爛，大量黃粘痰，留標本送檢。入院診斷考慮“重癥支氣管哮喘”，予甲基強的松龍80mg,氨茶堿0.25，硫酸鎂2.5分次點滴，癥狀不見好轉。結合支氣管鏡所見，絲狀真菌感染不能除外。病例分析病原學診斷：5月7日痰涂片可見真菌菌絲，菌絲呈45度折角，似曲霉菌絲。痰培養及BALF培養為煙曲霉菌。5月9日BALF培養為煙曲霉菌；5月11，12，13，16日氣道分泌物培養為煙曲霉菌。根據流行病學資料，微生物學證據，影像學檢查診斷為侵襲性肺曲霉菌感染（IPA）。治療：5月8日在莫西沙星的基礎上，加用兩性霉素B脂質體制劑，5月9日，12日，13日氣道滴入兩性霉素B脂質體，20日加用伏立康唑。病例分析5月21日，22日痰培養為銅綠假單胞菌，用派拉西林/他唑巴坦治