DB32T 3489-2018玉米粗縮病人工接種鑒定技術與抗性評價規程

ICS65.020B16備案號：江DB32蘇省地方標準DBT3489—2018價Technicalregulationforevaluatingmaizevarietiesresistancetomaizeroughdwarfsebyartificialinoculation江蘇省質量技術監督局發布IDB32/T3489—2018前言本標準按GB/T1.1—2014《標準化工作導則第1部分：標準的結構和編寫》編制。本標準由江蘇省農業科學院提出并歸口。本標準起草單位：江蘇省農業科學院。本標準起草人：周彤、杜琳琳、周益軍、程兆榜、蘭瑩、孫楓。1DB32/T3489—2018玉米粗縮病人工接種鑒定技術與抗性評價規程1范圍本標準規定了玉米品種粗縮病(病原：水稻黑條矮縮病毒Riceblack-streakeddwarfvirus)抗性人工接種鑒定的有關定義、技術規范及抗性評價標準。本標準適用于省級玉米品種試驗，品種抗病性比較試驗、主導品種的抗病性監測等均可參照執行。2規范性引用文件下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的的修改單)適用于本文件。NY/T1209-2006農作物品種試驗技術規程玉米NY/T2955-2016水稻品種試驗水稻黑條矮縮病抗性鑒定與評價技術規程3術語和定義下列術語和定義適用于本文件。3.1病株infectedplants發生玉米粗縮病癥狀的玉米植株(病株標準見6.2)。4接種用灰飛虱的準備4.1灰飛虱的來源田間采集灰飛虱若蟲或成蟲。4.2飼養灰飛虱的基本條件可調控溫、光的養蟲室(光照每天12h，溫度控制在25℃±2℃范圍內)、玻璃杯、尼龍紗布(網眼規格1mm)、養蟲架、適宜灰飛虱繁殖的水稻種子；轉移灰飛虱用黑布、毛筆、吸蟲管等。4.3灰飛虱群體的飼養選取飼喂灰飛虱的水稻種子(宜選用武育粳3號)用水浸種24h后，紗布覆蓋25℃±2℃催芽24h，選取發芽良好的種子25粒~30粒均勻播于盛有自然肥力土壤的玻璃杯(內徑為60mm~200mm)中；大約6d~7d后，待苗長至一葉一心期時，將待產的單頭灰飛虱移入杯中進行飼養，約3d后待灰飛虱產卵完畢將成蟲移出，7d~10d后開始孵化出1齡若蟲備用。4.4飼毒方法2DB32/T3489—2018RT-PCR鑒定為攜帶水稻黑條矮縮病毒的小麥、水稻或玉米病株栽種于5000mL燒杯中(RT-PCR方法按照NY/T2955-2016附錄B執行)，土面覆蓋濾紙，將4.3繁育的適量1齡~2齡灰飛虱移入其中,并用紗布封口。飼毒2d后將蟲移入預先育有武育粳3號秧苗的1000mL燒杯中飼養，循回11d~13d后，每批隨機取出100頭以上灰飛虱，按照NY/T2955-2016附錄A的要求檢測灰飛虱群體帶毒情況，計算灰飛虱群體帶毒率，備用。5接種5.1育苗方法參鑒品種(含試驗預設對照，宜采用玉米品種鄭丹958為感病對照)經浸種、催芽；選取50粒左右發芽良好的種子，均勻播于盛有自然肥力土壤的內徑為120mm~150mm玻璃杯中。5.2接蟲數量選取處于3齡~5齡的獲毒灰飛虱群體，按公式(1)計算接種數量：IVS=NPVS ()1式中:IVS—單株有效接種蟲量，單位為頭每株(頭/株)；N—單株接種灰飛虱數量，單位為頭每株(頭/株)；PVS—灰飛虱帶毒率。按照4.4中灰飛虱群體帶毒率，計算每株接蟲數量，使IVS值控制在3頭/株。5.3接種條件于玉米苗二葉一心期選擇長勢一致的30株苗用于接種(去除其它苗)。接種時間為1d~2d，接種溫度25℃±2℃，每天上午和下午各趕蟲一次，使灰飛虱分布均勻。接種后趕出灰飛虱并噴施殺蟲劑，保證玉米苗上的灰飛虱全部撲殺，噴藥后1d再將接種過的玉米苗移栽，15℃~30℃條件下培育。5.4重復重復三次。6調查6.1調查時間在玉米吐絲抽穗期調查玉米病株數。6.2調查標準玉米粗縮病發病癥狀：植株葉色濃綠、節間縮短，植株矮化，高度常不及健株的一半；葉片變寬變厚，葉片背面出現縱向蠟滴狀白色突起；植株根系少而短；雄穗不能抽出或無花粉、雌穗畸形不實或籽粒減少。依據癥狀有無按附錄A記錄發病株數量。6.3發病率計算參照公式(2)方法計算發病率。若出現感病對照品種的發病率小于50％，則應分析原因，并重新進行試驗。發病率Ri表示，數值以%計，按公式(2)計算：3DB32/T3489—2018Ri=ni100%nt ()2式中:Ri—發病率；ni—病株數；nt—總株數。計算結果精確到小數點后一位。7抗性評價7.1抗性分級標準根據發病率進行抗性評價，各級別評定標準遵照附錄B(參照NY/T1209-2006農作物品種試驗技術規程玉米)。7.2抗性評定當品種抗性在不同批次間鑒定結果表現不一致時，以發病最重的結果為準。4DB32/T3489—2018附錄A(規范性附錄)玉米粗縮病品種抗性調查記載表玉米粗縮病品種抗性調查記載表見表A.1。表A.1玉米粗縮病品種抗性調查記載表播種日期調查日期調查人記載人品種編號總株數病株數發病率…感病對照5DB32/T3489—2018附錄B(規范性附錄)玉米粗縮病品種抗性評