轉基因植物圖片

2023/2/1Copyright?Jiangyong轉基因西紅柿請您欣賞2023/2/1Copyright?Jiangyong抗蟲害作物2023/2/1Copyright?Jiangyong2023/2/1Copyright?Jiangyong番木瓜優良抗病品種2023/2/1Copyright?Jiangyong金大米2023/2/1Copyright?Jiangyong地雷探測草擬南芥2023/2/1Copyright?Jiangyong不會引起過敏的大豆2023/2/1Copyright?Jiangyong轉基因芥菜可減輕土壤污染2023/2/1Copyright?Jiangyong彩色玉米2023/2/1Copyright?Jiangyong巨型鮭魚2023/2/1Copyright?Jiangyong熒光魚2023/2/1Copyright?Jiangyong超級奶牛2023/2/1Copyright?Jiangyong培育出人耳的小鼠2023/2/1Copyright?Jiangyong轉基因豬2023/2/1Copyright?Jiangyong基因工程1944年確認了遺傳的物質基礎是DNA。1953年JWatson和FCricK提出了DNA雙螺旋結構模型，1958年MMesselson和FＷStahl證實了DNA半保留復制的機制，揭示了生物界遺傳性狀能世代遺傳的分子奧秘。重要的里程碑：雙螺旋結構的確立

1962年WSzybalski和ESzybalski

用人類DNA去轉化人類細胞,發現Ca2+有刺激DNA轉移入細胞的作用，是人工轉移遺傳物質給其它細胞的第1次嘗試。

1965年,Jacobf基因操縱子.1968年,NirenbergM,遺傳密碼.1967年Nirenberg提出遺傳工程可用于人類的基因治療。

60年代分子生物學作為一門獨立學科正式出現70年代初Graessmann和Dicumako莫定了用顯微注射法轉移基因。

1972年Grahant等對磷酸鈣介導的DNA轉移過程進行了詳細的研究，使這技術能被普遍接受和應用。

1972年,P.Berg:構建第一個DNA重組分子

2種病毒DNA的重組

1973年,S.S.Cohen:第一個基因克隆實驗基因工程的開始

1977年，基因工程產品的出現

H.W.Boyer,第一個基因工程產品(SS)

somatostatin

生長素釋放抑素70年代出現基因工程并有初步成果基因重組技術80年代的代表性研究領域基因工程產品的開發應用定點突變的研究與應用癌基因的發現

DNA-蛋白質分子相互辨認

PCR技術的出現人類基因組計劃開始醞釀90年代基因診斷技術漸趨成熟基因治療合法化人類基因計劃的啟動分子生物學各分支學科的建立與發展從20世紀50年代起，分子生物學領域的研究成果共獲得40項諾貝爾醫學-生理科學獎，說明分子生物學在生命科學研究中的重要性

根據桑格法開發的DNA自動定序機使一周（24小時運轉）解讀100萬甚至幾百萬個堿基成為可能。它為“人類基因組計劃”立下了汗馬功勞

2023/2/1Copyright?Jiangyong理論基礎DNA是遺傳物質的證明DNA雙螺旋結構和中心法則的確立遺傳密碼的破譯工程技術基因轉移載體的發現工具酶的發現DNA合成和測序技術的發現DNA體外重組的實現重組DNA表達實驗的成功第一例轉基因動物的問世PCR技術的發明基因工程：就是重組DNA技術，指在體外將不同來源的DNA進行剪切和重組，形成雜合DNA或稱嵌合DNA分子，然后將其導入特定的宿主細胞，得到大量擴增和表達，使宿主細胞獲得新的遺傳特性，產生新的基因產物。2023/2/1Copyright?Jiangyong已學：基因工程的“專用工具”基因的剪刀——限制性核酸內切酶基因的針線——DNA連接酶基因的運輸工具——運載體分子手術刀----限制性核酸內切酶(限制酶)磷酸二酯鍵EcoRI、SmaI限制酶提醒①切割的化學鍵為磷酸二酯鍵。②在切割目的基因和運載體時要求用同一種限制酶，目的是產生相同的黏性末端。③將一個基因從DNA分子上切割下來，需要2個限制酶，同時產生4個黏性末端2023/2/1Copyright?Jiangyong限制性核酸內切酶(限制酶)來源：主要從原核生物中分離化學本質：蛋白質作用：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。特性：特異性。即限制酶識別特定的脫氧核苷酸序列，切割特定位點切割后的DNA末端：黏性末端；平末端分子縫合針----DNA連接酶功能：將切下來的DNA片段拼接成新的DNA分子種類T4DNA連接酶：既能“縫合”雙鏈DNA片段互補的黏性末端，也能“縫合”雙鏈DNA的平末端（效率低）E·coliDNA連接酶：只能將雙鏈片段互補的黏性末端連接常用載體質粒λ噬菌體的衍生物動植物病毒基因進入受體細胞的載體（分子運輸車）2023/2/1Copyright?Jiangyong2023/2/1Copyright?Jiangyong(1)載體是基因運輸工具，在基因操作過程中，使用載體有兩個目的：一是用它作為運載工具，將目的基因送到宿主細胞中去；二是利用它在宿主細胞內對目的基因進行大量復制。

(2)種類：質粒(既存在于原核生物細菌中，也存在于真核生物酵母菌中)、λ噬菌體的衍生物、動植物病毒。(3)本質：DNA(其中質粒為環狀DNA分子)(4)作為載體必須具備三個條件：①能在宿主細胞內穩定保存并大量復制。②有1個或多個限制酶切點，以便與外源基因連接。

③具有某些標記基因，以便進行篩選。2023/2/1Copyright?Jiangyong2023/2/1Copyright?Jiangyong注意問題(1)一般來說，天然載體往往不能同時具備載體必須具備的條件，所以在基因工程中需要根據不同的和需要，對載體進行人工改建。現在所使用的質粒載體幾乎都是經過改建的。2023/2/1Copyright?Jiangyong(2)作為載體必須具有多個限制酶切點，而且每種酶的切點最好只有一個。因為某種限制性內切酶只能識別單一切點，若載體上有一個以上的酶切點，則切割重組后可能丟失某些片段，若丟失的片段含復制起點區，則進入受體細胞后便不能自主復制。一個載體若只有某種限制酶的一個切點，則酶切后既能把環打開接納外源DNA片段，又不會丟失自己的片段。2023/2/1Copyright?Jiangyong(3)大腸桿菌、枯草桿菌、土壤農桿菌等細菌中都有質粒。它存在于細菌的細胞質中，上面一般含幾個到幾百個基因，控制著細菌的抗藥性、固氮、抗生素合成等性狀。由于土壤農桿菌很容易感染植物細胞，使細胞生有瘤狀物。所以科學家培育轉基因植物時，常常用土壤農桿菌中的質粒做載體。(4)注意與細胞膜上載體的區別，兩者的化學本質和作用都不相同。操作在綠色紙上寫上…GGCTCCCGGGAATTCATTTTG……CCGAGGGCCCTTAAGTAAAAC…在紅色紙上寫上…TCCCGGGAATTCCCGGGAATTCTA……AGGGCCCTTAAGGGCCCTTAAGAT…如果用EcoRⅠ限制酶，情況?用什么酶連接？如果用SmaⅠ限制酶，情況?用什么酶連接？操作中涉及到的用具和材料分別綠色紙紅色紙剪刀透明膠條連接好的綠紅紙條歸納什么是基因工程?P1什么水平?原理？