第九空氣微生物

第9章空氣微生物南京醫科大學李磊

主要內容空氣生境特征空氣微生物的來源、種類、分布及其衛生學意義空氣微生物的檢測和衛生標準空氣微生物污染及其預防空氣微生物研究前景空氣微生物研究的重要性空氣的重要性空氣中存在微生物空氣微生物與人類健康密切相關空氣微生物學第一節空氣生境特征電離層和平流層微生物難以生存對流層是大氣中微生物生存和擴散的主要場所空氣生境特征空氣中缺乏微生物生長繁殖所需的營養物質和充足的水分。日光輻射對微生物有殺滅作用，細菌不能在空氣中繁殖。一般情況下，空氣中污染物越多，污染越嚴重，空氣微生物的種類和濃度也會越高。空氣中無固有微生物叢，空氣中的微生物是暫時的、可變的。第二節來源、種類、分布及其衛生學意義一、空氣微生物的來源空氣微生物來源于其他外環境和人、動植物的活動等，是自然因素和人為因素污染的結果。室外空氣微生物來源土壤水面工農業產生室內空氣微生物來源室內空氣微生物來源人和動物呼吸道排出微生物機械性移動微生物實驗室操作不當呼吸道感染患者二、空氣微生物的種類細菌結核桿菌肺炎雙球菌化膿性鏈球菌白喉桿菌金葡菌腦膜炎奈瑟菌真菌黃曲霉黑曲霉青霉菌病毒流感病毒腺病毒三、空氣微生物的分布一般不繁殖微生物在空氣中為過路客。生存能力強經空氣傳播的微生物具有耐干燥、抵抗力強。時空分布不均室外空氣分布：主要是非致病性腐生菌，以及對干燥和輻射有抵抗力的真菌孢子室內空氣分布：室內空氣中微生物可來自室外空氣，但主要來自人體或人類活動時空分布不均高度分布：離地面越高，微生物含量越少，粒子也越小，抵抗力越強，致病性越小水平分布：與室內外分布關系密切。城市上空和人群密集場所的微生物、尤其是病原微生物數量明顯增高時間分布：一天內不同時間微生物分布不一樣，也有季節性變化易受氣象和大氣污染影響氣象、氣候(濕度、溫度、風力等)對空氣微生物的種類和數量影響較大四、空氣微生物的衛生學意義動物疫病的傳播和感染。引起變態或過敏反應。食品的腐敗變質或引起食物中毒。植物疫病的傳播。潔凈生產。生物戰劑及危害。第三節空氣微生物的檢測和衛生標準一、空氣微生物樣品的特點1.一般情況下，空氣微生物濃度較低。2.能夠存活的微生物都有較強的耐受力。3.與各種顆粒物結合形成微生物氣溶膠。二、空氣微生物采集和檢測方法

自然沉降法慣性撞擊式采樣法過濾阻留式采樣法靜電沉著采樣法溫差迫降采樣法其他（一）自然沉降法（沉降平板法）根據空氣中攜帶有微生物氣溶膠粒子在地心引力的作用下，以垂直的自然方式沉降到瓊脂培養基上，經24h、37℃溫箱培養基計算出菌落數。應以菌落形成單位cfu/皿或cfu/m3表示。簡單方便，缺點是采集效率低、穩定性差。空氣采樣（1）選擇有代表性的采樣點，一般在室內四角及室中央，放置含營養瓊脂的平皿。（2）打開皿蓋（將皿蓋置于平皿底下，不可仰放，以防污染），將有培養基的平皿，暴露于空氣5分鐘（視空氣清潔程度而定），采樣畢合上皿蓋，記錄采樣時間。（3）將已采集的培養基在6h內送實驗室，置于37℃溫箱培養48小時。（4）記錄5個平皿的菌落總數。

結果計算N-培養后平皿上菌落數；

A-平皿面積（cm2）

t-暴露時間（min）（二）慣性撞擊式采樣利用抽氣裝置在單位時間將一定容量的含有微生物粒子的空氣，通過某些裝置形成直線或曲線運動的高速氣流，使氣流中微生物粒子也隨之高速運動，當氣流改變方向時，運動著的粒子因慣性繼續照直前進撞擊并粘集于培養基上。直線氣流慣性撞擊法全玻璃液體撞擊式采樣器固體撞擊式采樣器曲線氣流慣性撞擊法1.全玻璃液體撞擊式采樣器利用噴射氣流的方式將空氣中的微生物粒子收集在小體積的液體中。全玻璃液體撞擊式采樣器的優點適于高濃度的空氣微生物采樣。樣品可接種不同的培養基培養計數。能測出空氣中活微生物數量。采樣液有保護作用，對脆弱的微生物(如病毒、立克次氏體)也能采樣。捕獲率高，尤其是對于小顆粒。采樣器一般由玻璃制成，利于消毒滅菌處理，使用方便、價格低廉、可反復使用。2.固體撞擊式采樣器單級撞擊式采樣型將空氣中不同大小的含菌粒子撞擊于一個采集面上，只能測定空氣中微生物的濃度。多級撞擊式采樣型將空氣中不同大小的含菌粒子采集于不同的采集面上，可測定空氣中微生物的濃度，也可了解粒子大小分布情況，但結構比較復雜，采樣耗費較大。單級撞擊式采樣器JWL-I空氣微生物采樣器單級篩孔空氣撞擊采樣器Anderson多級篩孔空氣撞擊采樣器Anderson采樣器使用注意事項采樣器流量為28.3L/min。可用轉子流量計進行校對。注意各節的密封度。撞擊距離對采樣有影響。平皿中培養基厚度影響采樣距離，以加27ml培養基較為合適，此時撞擊距離為2.5mm左右。采樣器的消毒可用酒精擦拭，也可用高壓蒸氣滅菌或環氧乙烷熏蒸。微生物濃度過高時，顆粒重疊，會產生誤差。最多的一節菌落數以50～250cfu/m2為宜。結果計算3.曲線氣流慣性撞擊法－離心采樣器LWC-1型離心式空氣微生物采樣器撞擊法檢測空氣中微生物數量培養后培養前（三）過濾阻留式采樣（四）靜電沉著類采樣器利用高壓電場，使空氣中的微生物粒子帶上一定量的電荷后，而被帶相反電荷的采集面所吸附。如何選用采樣方法采樣器的靈敏度采樣效率重復性微生物的存活率使用方便易于分析可區分粒子的大小價格（五）檢測方法定性檢測：形態學、免疫學、核酸檢測等方法。定量檢測：干重法、菌落計數、濁度法等。二、空氣微生物衛生標準(菌落總數)《室內空氣質量標準》GB/T18883-2002

菌落總數撞擊法2500cfu/m3二、空氣微生物衛生標準我國公共場所空氣衛生細菌學標準撞擊法（cfu/m3）沉降法（cfu/皿）適用范圍≤1000≤103～5星級賓館、飯店≤1500≤102星級以下賓館和非星級帶空調賓館、飯店≤2500≤30普通旅店、招待所、影劇院、音樂廳、錄像廳（室）、酒吧、茶座、咖啡廳、游藝廳、舞廳、圖書館、博物館、美術館、飛機客艙、飯館（餐廳）≤4000≤40理發店、美容院（店）、游泳館、體育館、展覽館、商場（店）、書店、醫院候診室、候機室、旅客列車車廂、輪船客艙≤7000≤75候車室、候船室WHO推薦的醫院各部門空氣細菌標準級別菌量（cfu/m3）適用范圍I級區<10器官移植、心血管、矯形等外科手術室保護性隔離等，灌注或配制注射液實驗室II級區<200無菌或手術室、供應室、嬰兒室、中盡滅菌單位術后恢復室、早產兒及產房、石膏室（如在手術區內）、重癥監護病房III級區200～500一般病房、治療室、放射室、衣帽室、小手術室浴室、按摩室、洗浴室IV級區傳染病室、放射性核素室V級區衛生間、貯藏室、太平間等居室內空氣衛生細菌學評價的參考指標夏季標準冬季標準評價細菌總數（cfu/m3）綠色和溶血性鏈球菌（cfu/m3）細菌總數（cfu/m3）綠色和溶血性鏈球菌（cfu/m3）清潔空氣<1500<16<4500<36污染空氣>2500>36>7000>124第四節空氣微生物污染及其預防一、空氣微生物污染傳播方式經塵埃傳播經飛沫傳播經飛沫核傳播:組成，傳播性最強微生物氣溶膠

氣溶膠(aerosol)：以固體或液體微小顆粒分散于空氣中的分散體系，它是由分散相(固體或液體微粒)和分散介質[又稱連續相(空氣)]組成的均勻體系，大小一般在0.1～10μm之間微生物氣溶膠(microbialaerosol)屬分散性氣溶膠，包括液態和固態，主要特點為微粒上附著有各種微生物直徑>5μm，被阻于鼻腔直徑4～5μm

，僅到支氣管直徑1～4μm

，到達肺泡直徑<1μm

，部分停留于肺泡，其余隨呼吸排出微生物氣溶膠大小與其感染性的關系氣溶膠微生物的存活特點物理衰減：微粒自身從介質中分離出來的衰減生物衰減：微生物自身的死亡影響因素：固有的生命力太陽輻射溫度

RH二、空氣微生物的預防綜合性措施控制污染來源個人防護物理方法物理通風法紫外線照射負離子發生器化學消毒劑消毒(一)控制污染來源(二)物理通風法自然對流通風湍流空調通風過濾層流通風一般（非層流）潔凈室示