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實驗三雙重染色與永久

裝片的制作授課教師：鄭磊2008.12.10實驗目的學習并掌握植物制片的雙重染色法掌握徒手切片制成永久裝片的方法實驗原理番紅-固綠對染法，是植物制片中最普遍的一種二重染色法，其染色程序簡單并能清晰地顯示出細胞結構。番紅為堿性染料，能將木質化、角質化、栓質化的細胞壁，以及細胞核中的染色質、染色體和花粉外壁等染成紅色；固綠為酸性染料，能使細胞質及纖維素的細胞壁染成綠色。實驗用具顯微鏡、載玻片、蓋玻片、單面刀片、雙面刀片、培養皿、毛筆、滴瓶、膠頭滴管、濾紙實驗材料與試劑實驗材料

吊蘭莖、蒜苔試劑

1%番紅水溶液、1%固綠酒精溶液實驗方法徒手切片

將材料切成薄而透明的切片，鏡檢以選擇較理想的薄片。染色

將選好的切片置于載玻片中央，加一滴1%番紅水溶液，染色15~20min，用濾紙吸去染液，再滴蒸餾水洗去浮色。實驗方法脫水

依次滴少許30%

50%

70%

85%

95%各等級酒精各10~15s進行脫水，每滴一滴酒精后用濾紙吸去。復染

吸去95%酒精后，加一滴1%固綠酒精溶液，復染5~10s，再滴加95%酒精去浮色。實驗方法透明

吸去95%酒精，滴加無水酒精，然后經1/2無水酒精+1/2二甲苯二甲苯（兩次）每次2~3s，使材料完全透明。透明后保持二甲苯不揮發，蓋好蓋片，鏡檢。制成永久裝片

掀開蓋片，滴一滴中性樹膠，再加蓋片封片，然后置于30~35℃恒溫箱中烘干。葉的橫切玉米莖橫切南瓜莖橫切南瓜莖縱切作業制作一張合格的雙重染色切片，要求薄

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