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DB34DB34/T2997—2017豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌檢驗操作規程ProtocolofexaminationforActinobacilluspleuropneumoniae安徽省質量技術監督局發布I1GB4789.28食品安全國家標準食品微生物學檢驗培NY/T537豬放線桿菌胸膜肺炎診3.4冰箱：2℃~5℃,-20℃。24檢驗程序病料(鼻腔棉拭子、肺臟、淋巴結等)病料(鼻腔棉拭子、肺臟、淋巴結等)選取可疑菌改良TSB肉湯培養基3無菌操作采集動物血，每頭不少于10mL。自然凝固后無菌分離血清，分裝，加蓋密封后4～8℃存于飽和氯化鈉溶液或30％甘油緩沖鹽水溶液5.2.2豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌形態學特征：革蘭氏陰性小球桿菌或纖細的小桿nm，長度60～450nm。有莢膜和菌毛，不形成芽孢且無鞭毛，有的成雙排列。新鮮5.3.1對沒有受污染的新鮮病料用經火焰滅菌并冷卻的接種環蘸取病料內部組ONPG試驗、尿素酶試驗、硫化氫試驗、硝酸鹽還原試驗陽性，靛基質試驗、甲基紅試驗、V-P試45.5.1豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌對小鼠、大鼠、豚鼠、家兔均有致病力，其湯純培養物做動物試驗用。小鼠腹腔注射組織懸液0.2mL或純培養菌液0.1有纖維素性胸膜肺炎等癥狀，肝部腫大。以死亡小鼠的心血或臟器制成涂片，革++++++------7.1綜合以上培養形態與染色特性，生化5培養基的配制20min。待培養基冷卻至55℃左右時,以無菌方式添加無菌綿羊血，混勻，傾注無菌平皿，4℃保存備待培養基冷卻至55℃左右時，每管均添加NAD(10～30μL/mL)以及無菌6將24.0gTSA–YE瓊脂溶于500mL超純水中，充分攪拌，待完全溶解混勻后，121℃高壓滅菌將24.0gTSA–YE瓊脂溶于500mL超純水中，充分攪拌，待完全溶解混勻后，121℃高壓滅菌20min。待培養基冷卻至80℃左右時,以無菌方式添加無菌綿羊血，混勻，傾注無菌平皿，4℃保存備7將1.5g十二水合磷酸氫二鈉、0.1g氯化鉀、4.0g氯化鈉、0.1g磷酸二氫鉀溶于500mL8上游引物：5′-GATAAACCTTTT9B.2.4結果判定目的基因大小為342bp。試驗成立，被

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