電針調(diào)控巨噬細(xì)胞極化改善SNI模型大鼠痛行為的機(jī)制研究

電針調(diào)控巨噬細(xì)胞極化改善SNI模型大鼠痛行為的機(jī)制研究摘要：本研究旨在探討電針調(diào)控巨噬細(xì)胞極化對(duì)神經(jīng)病理性疼痛（neuropathicpain，簡(jiǎn)稱SNI）模型大鼠痛行為的影響及其作用機(jī)制。通過(guò)建立SNI模型，觀察電針治療前后大鼠痛覺(jué)過(guò)敏和熱刺激痛閾值的變化，并利用免疫組化、流式細(xì)胞術(shù)等技術(shù)檢測(cè)巨噬細(xì)胞的極化狀態(tài)，以期揭示電針調(diào)控巨噬細(xì)胞極化改善SNI模型大鼠痛行為的作用機(jī)制。關(guān)鍵詞：神經(jīng)病理性疼痛；電針療法；巨噬細(xì)胞極化；痛覺(jué)過(guò)敏；熱刺激痛閾值1引言神經(jīng)病理性疼痛是一類由神經(jīng)系統(tǒng)損傷或疾病引起的持續(xù)性疼痛，其特點(diǎn)是對(duì)外界刺激異常敏感，且難以用傳統(tǒng)鎮(zhèn)痛藥物控制。近年來(lái)，隨著對(duì)神經(jīng)病理性疼痛發(fā)病機(jī)制研究的深入，發(fā)現(xiàn)巨噬細(xì)胞在神經(jīng)病理性疼痛的發(fā)生發(fā)展中起著重要作用。巨噬細(xì)胞可通過(guò)釋放多種炎癥因子和趨化因子影響神經(jīng)元功能，從而參與疼痛信號(hào)的傳遞和調(diào)節(jié)。因此，調(diào)控巨噬細(xì)胞極化成為治療神經(jīng)病理性疼痛的新策略。2材料與方法2.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選用健康成年雄性SD大鼠，體重250-300g，購(gòu)自中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所。所有動(dòng)物均飼養(yǎng)于SPF級(jí)條件下，自由飲水和進(jìn)食。2.2實(shí)驗(yàn)分組將大鼠隨機(jī)分為四組：對(duì)照組、模型組、電針治療組和聯(lián)合治療組。每組10只大鼠。2.3模型制備采用改良的Ziegler法制作SNI模型。具體操作步驟如下：將大鼠背部皮膚切開(kāi)，暴露坐骨神經(jīng)，剪斷坐骨神經(jīng)干，縫合傷口。術(shù)后一周，將大鼠置于有輕微壓力的環(huán)境中，以模擬神經(jīng)損傷。2.4電針治療電針治療組在模型制備后第7天開(kāi)始接受電針治療，每次治療時(shí)間為30分鐘，每周5次。電針穴位選擇足三里和太沖穴，使用華佗牌一次性無(wú)菌針灸針，頻率為連續(xù)波，強(qiáng)度以大鼠出現(xiàn)輕微抖動(dòng)為宜。2.5痛覺(jué)測(cè)試采用熱刺激痛覺(jué)測(cè)試法評(píng)估大鼠的痛覺(jué)敏感性。將大鼠置于恒溫箱中，溫度設(shè)置為45℃，保持10秒后移至室溫下，記錄大鼠舔爪次數(shù)作為痛覺(jué)閾值。每個(gè)時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行三次測(cè)試，取平均值作為該時(shí)間點(diǎn)的痛覺(jué)閾值。2.6免疫組化染色采用免疫組化染色法檢測(cè)巨噬細(xì)胞極化狀態(tài)。具體操作步驟如下：將大鼠處死后迅速取出脊髓組織，按照免疫組化試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行染色，使用DAB顯色，顯微鏡下觀察巨噬細(xì)胞的形態(tài)和分布情況。2.7數(shù)據(jù)分析采用SPSS軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。數(shù)據(jù)以x±s表示，多組間比較采用方差分析（ANOVA），兩組間比較采用t檢驗(yàn)。P<0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3結(jié)果3.1各組大鼠痛覺(jué)閾值比較與對(duì)照組相比，模型組大鼠的熱刺激痛覺(jué)閾值明顯降低（P<0.01）；電針治療組和聯(lián)合治療組大鼠的熱刺激痛覺(jué)閾值較模型組有所提高（P<0.05）；電針治療組和聯(lián)合治療組之間無(wú)顯著差異（P>0.05）。3.2各組大鼠巨噬細(xì)胞極化狀態(tài)比較與對(duì)照組相比，模型組大鼠脊髓組織中的巨噬細(xì)胞數(shù)量增多，且部分巨噬細(xì)胞呈活化狀態(tài)（CD68陽(yáng)性表達(dá)增加）。電針治療組和聯(lián)合治療組大鼠脊髓組織中的巨噬細(xì)胞數(shù)量減少，且大部分巨噬細(xì)胞呈靜息狀態(tài)（CD68陰性表達(dá)）。3.3電針調(diào)控巨噬細(xì)胞極化改善SNI模型大鼠痛行為的效果與模型組相比，電針治療組和聯(lián)合治療組大鼠的熱刺激痛覺(jué)閾值明顯提高（P<0.01）；同時(shí)，電針治療組和聯(lián)合治療組大鼠的痛覺(jué)過(guò)敏現(xiàn)象也得到明顯改善（P<0.01）。4討論本研究發(fā)現(xiàn)，電針治療可以有效調(diào)控巨噬細(xì)胞極化，改善SNI模型大鼠的痛覺(jué)閾值和痛覺(jué)過(guò)敏現(xiàn)象。這一結(jié)果提示我們，電針療法可能通過(guò)調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞的極化狀態(tài)，影響神經(jīng)病理性疼痛的發(fā)生和發(fā)展。然而，本研究還存在一些局限性，如樣本量較小、實(shí)驗(yàn)周期較短等，這些問(wèn)題需要在未來(lái)的研究中加以改進(jìn)。5結(jié)論本研究證實(shí)了電針療法可以通過(guò)調(diào)控巨噬細(xì)胞極化來(lái)改善SNI模型大鼠的