SNT 5875-2025 出口食品及加工環境中李斯特菌屬計數方法標準立項發展報告

出口食品及加工環境中李斯特菌屬計數方法標準立項發展報告EnglishTitle:StandardizationDevelopmentReport:MethodforEnumerationof*Listeria*spp.inExportFoodandProcessingEnvironment摘要本報告系統闡述了行業標準SN/T5875-2025《出口食品及加工環境中李斯特菌屬計數方法》的立項背景、研制過程、核心技術內容及其對我國食品安全和國際貿易的重大意義。李斯特菌屬作為一種在自然界廣泛分布且具有致病性的食源性病原微生物，對免疫力低下人群及孕婦具有嚴重威脅，尤其是在冷藏食品中易于生長繁殖的特性，使其成為國際食品安全領域高度關注的重點對象。為應對日益嚴格的國際食品安全標準和貿易壁壘，提升我國出口食品的檢驗檢測能力和國際競爭力，本標準在充分借鑒國際先進標準（如ISO11290系列）和國內外最新研究成果基礎上，明確了針對出口食品及其加工環境（即環境監控）中李斯特菌屬計數的規范性方法。本報告重點分析了標準的技術路線、驗證數據及實施要點，論證了該標準的科學性、適用性和可操作性。結論指出，SN/T5875-2025標準的發布，不僅填補了我國在出口食品領域針對李斯特菌屬計數方法的專項標準空白，也為促進我國食品出口貿易、保障消費者健康安全提供了堅實的技術支撐。關鍵詞李斯特菌屬；食源性致病菌；計數方法；出口食品；加工環境；微生物檢測；行業標準Keywords:*Listeria*spp.;FoodbornePathogen;EnumerationMethod;ExportFood;ProcessingEnvironment;MicrobiologicalDetection;IndustryStandard1.引言食品安全是關乎人民生命健康和國家經濟發展的重要基石。在全球貿易一體化背景下，各國對進出口食品的微生物安全要求日趨嚴苛。李斯特菌屬（*Listeria*spp.）是食品中常見的致病菌之一，其中單核細胞增生李斯特菌（*Listeriamonocytogenes*）是導致人類李斯特菌病的主要病原體，其感染后可引起敗血癥、腦膜炎等嚴重疾病，死亡率高達20%-30%。李斯特菌的顯著特征之一是能在低溫（如0-4℃的冷藏條件）下緩慢生長，這使得傳統的冷鏈食品成為其高風險載體。因此，國際上如歐盟、美國、加拿大、澳大利亞等主要貿易市場，均在食品安全法規中明確規定了對即食食品中單核細胞增生李斯特菌及李斯特菌屬的限量標準，并強制要求食品加工企業實施環境監控（EnvironmentalMonitoring）以評估和追溯交叉污染。我國作為世界第一大食品出口國，食品種類繁多，涵蓋了冷凍蔬菜、水產品、乳制品、肉制品及即食食品等大量易被李斯特菌污染的品類。然而，在SN/T5875-2025發布之前，我國針對出口食品中李斯特菌屬的檢測標準，雖存在定性的檢測方法，但專門的、與國際接軌的定量計數方法標準尚顯不足。這導致我國出口企業在進行產品出廠檢驗及過程控制時，可能因檢測方法不統一、靈敏度不足或與國際標準存在差異而導致技術性貿易壁壘，引發貿易爭議。為響應《中華人民共和國食品安全法》及海關總署關于加強進出口食品監管工作要求，有效規避貿易風險，提升檢測技術的先進性與一致性，海關總署組織相關單位立項制定SN/T5875-2025《出口食品及加工環境中李斯特菌屬計數方法》。本標準旨在建立一套覆蓋食品基質及加工環境樣本（如拭子、水樣等）的、準確可靠的李斯特菌屬定量檢測技術規范，以解決當前出口檢測體系中的短板問題。2.標準編制的背景與依據2.1國際形勢分析：在國際上，李斯特菌的控制是食品安全管理的核心議題。國際食品法典委員會（CAC）制定了《食品微生物標準制定和應用原則》，其中對單核細胞增生李斯特菌的限量值有明確規定。特定出口市場如歐盟（歐盟法規EC2073/2005及其修訂版），對即食食品規定在企業生命周期內，單核細胞增生李斯特菌的水平必須保持低于100CFU/g。同時，要求企業建立基于HACCP原理的食品衛生操作規程（PRP）和危害分析關鍵控制點（HACCP）計劃，其中環境李斯特菌屬的監控是評估控制措施有效性的關鍵指標。因此，出口企業無法避免需采用準確的計數方法進行內部質控和最終產品放行。2.2國內技術現狀：國內現行的食品微生物檢驗標準，如GB4789.30-2016《食品安全國家標準食品微生物學檢驗單核細胞增生李斯特氏菌檢驗》，主要側重于定性檢測（即檢出/未檢出），且其計數方法部分（第二法）在基質適用性、靈敏度及與國際標準的銜接上存在優化空間。同時，專門針對“李斯特菌屬”這一總屬的計數方法國家標準尚屬空白。ISO11290-2:2017《食品鏈微生物學李斯特菌屬檢測和計數水平方法第2部分：計數方法》是國際公認的權威計數方法，但國內需要將其轉化為符合我國國情和出口檢驗需求的標準。因此，制定SN/T5875-2025，是提升我國出口檢測技術水平、實現與國際標準互認的迫切需求。2.3政策與法規支撐：本標準依據《中華人民共和國標準化法》、《中華人民共和國進出口商品檢驗法》及其實施條例，同時緊密參考歐盟EC2073/2005法規、美國FDA的“李斯特菌屬規則”（ListeriaRule,21CFRPart117）、以及CAC相關指南。標準研制過程嚴格按照國家標準化管理委員會和海關總署關于行業標準制修訂的工作程序和規定執行，確保標準的科學性、規范性和權威性。3.標準核心技術內容SN/T5875-2025標準的核心是規定了采用水平方法（HorizontalMethod）對出口食品及加工環境中李斯特菌屬進行計數。其主要技術內容包括：3.1適用范圍：本標準規定了出口食品（包括即食食品、乳制品、水產品、肉制品、蔬菜等）及其加工環境（包括設備表面、地面、排水口、人員手套等拭子樣品，以及生產用水、廢水等液體樣品）中李斯特菌屬的計數方法。3.2方法原理：采用基于選擇性培養基的平板計數法。具體步驟為：樣品經適當處理后，進行選擇性增菌液（如Lee氏肉湯，LEB）的初增菌，以修復受損細胞并富集李斯特菌。隨后，將培養物接種于選擇性顯色培養基（如ALOA瓊脂，AgarListeriaOttavianiAgosti）上進行分離培養。典型的李斯特菌落在ALOA平板上呈現藍色/藍綠色菌落并伴有透亮的光暈，通過菌落形態及必要的生化或分子生物學鑒定確認，計數后得出每克（mL）樣品或每拭子中李斯特菌屬的菌落形成單位（CFU）。3.3主要技術參數：-樣品前處理：規定了不同類型樣品（固體、半固體、液體、表面拭子）的稀釋液、均質化條件及稀釋度選擇。-選擇性增強：采用初級增菌步驟（30℃±1℃，24h±2h），結合選擇性添加劑，有效抑制非目標菌群。-分離與確認：推薦使用ALOA瓊脂等商品化顯色培養基，相比傳統的牛津瓊脂（OXA）和PALCAM瓊脂，ALOA具有更高的特異性（可有效區分單核細胞增生李斯特菌和英諾克李斯特菌等其他李斯特屬）。標準附錄中提供了生化鑒定和PCR確認的備選方案。-計數原則：明確規定了最低檢出限（如食品標準為10CFU/g或CFU/mL）和報告方式，采用ISO7218標準中的菌落計數規則。3.4性能指標驗證：在標準研制過程中，項目組組織國內多個檢驗檢疫實驗室（如深圳、寧波、上海等直屬海關技術中心）進行了協同驗證實驗。通過人工污染樣品（如雞肉、奶酪、生菜）和自然污染樣品（加工環境拭子），驗證了方法的靈敏度（在1CFU/25g水平下仍能有效檢測）、特異性（對李斯特菌屬內不同種和食源性背景菌的區分能力）以及重復性和再現性（在CODEX37-2008框架內，計算相對標準偏差RSD<30%）。結果證明該方法可滿足出口食品的嚴格限值要求。4.介紹主要參與單位：中國海關科學技術研究中心中國海關科學技術研究中心（簡稱“海科中心”）是本標準的核心起草單位之一，在標準的立項論證、方法優化、驗證實施及最終文本編寫中發揮了關鍵作用。海科中心是海關總署直屬的綜合性技術研究機構，其主要職責是承擔海關系統重大科研項目、技術標準和法規的制修訂工作，是海關系統食品安全、動植物檢疫、商品檢驗等領域的最高技術權威機構。中心擁有國家食品安全重點實驗室、國家生物安全重點實驗室等多個國家級平臺，并長期與國際食品安全組織、世界衛生組織、國際標準化組織（ISO）保持緊密合作。在SN/T5875-2025的研制過程中，海科中心組織了一支由高級研究員、博士及一線檢驗專家組成的骨干團隊。團隊首先對全球范圍內李斯特菌病的流行趨勢和各國法規動態進行了深入的系統性綜述，特別是針對冷凍蔬菜、熟食肉制品等重點風險產品，分析了我國出口貿易面臨的技術壁壘。其次，團隊成員對現有國標（GB4789.30）的計數方法與國際標準（ISO11290-2）進行了細致的比對研究，針對環境樣本復雜基質（如拭子背景菌群干擾大）的計數困難，優化了增菌條件和涂布方法，確保在高背景菌群干擾下仍能準確識別和計數目標菌落。最后，海科中心依托下屬的全國海關微生物檢測技術協作組，組織了覆蓋東部、南部沿海及內陸主要出口加工區的多家檢驗檢疫實驗室開展協同驗證，積累了大量的數據支撐，為標準的科學性、普適性和可操作性提供了堅實保證。通過領導和參與本標準，海科中心不僅填補了國內該領域的標準空白，也進一步鞏固了我國在出入境食品檢驗領域內的技術領軍地位。5.結論與展望SN/T5875-2025《出口食品及加工環境中李斯特菌屬計數方法》行業標準的發布與實施，標志著我國在出口食品微生物檢測領域取得了一項重要技術突破。該標準具有以下顯著價值：1.填補標準空白，推動技術升級：首次建立了我國針對“李斯特菌屬”這一總屬的、與國際水平相當的計數方法標準。相比僅注重單核細胞增生李斯特菌檢測的標準（如GB4789.30），本標準以“李斯特菌屬”為靶標，更廣泛地覆蓋了加工環境中作為指示菌的其它李斯特菌種（如英諾克李斯特菌常被視為衛生指示菌），有助于企業更早發現交叉污染源，實施更精準的過程管控。2.打破貿易壁壘，促進國際貿易：本標準完全與國際通行標準ISO11290系列接軌，其關鍵檢測能力得到主要貿易伙伴的認可。我國出口企業使用本標準進行產品檢驗和報告，將更容易被美國FDA、歐盟EFSA、加拿大CFIA等監管機構采信，從而有效避免因檢驗方法差異導致的貨物扣留、退貨或索賠，顯著降低貿易成本。3.強化風險防控，守護公共健康：采用靈敏、特異的計數方法，有助于出口食品企業建立有效的“從農場到餐桌”的全鏈條食品安全控制體系。特別是在冷鏈食品管理中，可精準評估加熱或冷藏加工后的李斯特菌滅活、存活和再生長風險，為產品的科學保質期評估提供關鍵數據。展望未來，隨著基因測序、智能化顯微分析等新技術的快速發展，以及消費者對食品安全要求的不斷提高，李斯特菌的檢