DB13-T 1114-2009 小麥粉中熒光增白劑的測定

DB13T11142009小麥粉中熒光增白劑的測定1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了小麥粉中熒光增白劑的測定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于小麥粉中熒光增白劑的測定。2原理試樣中的熒光增白劑經(jīng)提取后，利用熒光分光光度計(jì)在特定激發(fā)波長和發(fā)射波長條件下測定其熒光強(qiáng)度，與標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量。3試劑與材料除非另有說明，本標(biāo)準(zhǔn)所用試劑均為分析純，水為GB/T6682規(guī)定的三級水。3.1甲醇：色譜純。3.2乙酸乙酯：色譜純。3.3熒光增白劑標(biāo)準(zhǔn)品：已知純度的熒光增白劑標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。3.4標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液：準(zhǔn)確稱取熒光增白劑標(biāo)準(zhǔn)品10.0mg，用甲醇溶解并定容至100mL，配制成100μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，于4℃避光保存。3.5標(biāo)準(zhǔn)工作溶液：吸取標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，用甲醇逐級稀釋成濃度為0.1μg/mL、0.5μg/mL、1.0μg/mL、2.0μg/mL、5.0μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，現(xiàn)用現(xiàn)配。4儀器與設(shè)備4.1熒光分光光度計(jì)：配備1cm石英比色皿。4.2分析天平：感量0.1mg。4.3超聲波清洗器。4.4離心機(jī)：轉(zhuǎn)速≥4000r/min。4.5渦旋混合器。4.6氮吹儀。4.7具塞刻度試管：10mL、25mL。4.8微量移液器：100μL、1000μL。5分析步驟5.1試樣制備稱取混合均勻的小麥粉試樣5.0g（精確至0.01g），置于50mL具塞離心管中，加入20mL甲醇，渦旋混合2min，超聲提取20min，以4000r/min離心10min，將上清液轉(zhuǎn)移至25mL容量瓶中。殘?jiān)儆?0mL甲醇重復(fù)提取一次，合并上清液，用甲醇定容至刻度，搖勻，經(jīng)0.45μm濾膜過濾，待測。5.2測定條件熒光分光光度計(jì)測定條件：激發(fā)波長：350nm發(fā)射波長：430nm狹縫寬度：5nm靈敏度：中檔5.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制分別吸取0.1μg/mL、0.5μg/mL、1.0μg/mL、2.0μg/mL、5.0μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，按5.2測定條件測定熒光強(qiáng)度。以熒光強(qiáng)度為縱坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。5.4試樣測定取試樣提取液，按5.2測定條件測定熒光強(qiáng)度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出試樣中熒光增白劑的濃度。6結(jié)果計(jì)算試樣中熒光增白劑的含量按式（1）計(jì)算：X=(c×V)/m式中：X——試樣中熒光增白劑的含量，單位為毫克每千克（mg/kg）；c——從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出的試樣提取液中熒光增白劑的濃度，單位為微克每毫升（μg/mL）；V——試樣提取液定容體積，單位為毫升（mL）；m——試樣質(zhì)量，單位為克（g）。計(jì)算結(jié)果保留兩位有效數(shù)字。7精密度7.1重復(fù)性在同一實(shí)驗(yàn)室，由同一操作者使用相同設(shè)備，按相同的測試方法，并在短時(shí)間內(nèi)對同一被測對象相互獨(dú)立進(jìn)行的測試獲得的兩次獨(dú)立測試結(jié)果的絕對差值不大于這兩個(gè)測定值的算術(shù)平均值的10%。7.2再現(xiàn)性在不同實(shí)驗(yàn)室，由不同操作者使用不同設(shè)備，按相同的測試方法對同一被測對象相互獨(dú)立進(jìn)行的測試獲得的兩次獨(dú)立測試結(jié)果的絕對差值不大于這兩個(gè)測定值的算術(shù)平均值的15%。8檢出限和定量限本方法的檢出限為0.5mg/kg，定量限為1.5mg/kg。9質(zhì)量控制9.1空白試驗(yàn)每批樣品測定時(shí)應(yīng)同時(shí)進(jìn)行空白試驗(yàn)，空白值應(yīng)低于方法檢出限。9.2加標(biāo)回收每批樣品應(yīng)進(jìn)行加標(biāo)回收試驗(yàn)，加標(biāo)回收率應(yīng)在85%~115%之間。9.3標(biāo)準(zhǔn)曲線每批樣品測定時(shí)應(yīng)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，相關(guān)系數(shù)應(yīng)不小于0.999。10注意事項(xiàng)10.1熒光增白劑對光敏感，標(biāo)準(zhǔn)溶液和試樣提取液應(yīng)避光保存。10.2測定過程中應(yīng)避免強(qiáng)光直射，以免影響熒光強(qiáng)度的測