YY/T 1561-2017組織工程醫療器械產品動物源性支架材料殘留α -Gal抗原檢測

ICS1104040

C45..

中華人民共和國醫藥行業標準

YY/T1561—2017

組織工程醫療器械產品

動物源性支架材料殘留α-Gal抗原檢測

Tissueengineeringmedicaldeviceproducts—

Remnantα-Galantigendeterminationinscaffoldmaterialsutilizing

animaltissuesandtheirderivatives

2017-03-28發布2018-04-01實施

國家食品藥品監督管理總局發布

YY/T1561—2017

前言

本標準按照給出的規則起草

GB/T1.1—2009。

請注意本文件的某些內容可能涉及專利本文件的發布機構不承擔識別這些專利的責任

。。

本標準由國家食品藥品監督管理總局提出

。

本標準由全國外科植入物和矯形器械標準化技術委員會組織工程醫療器械產品分技術委員會

歸口

(SAC/TC110/SC3)。

本標準起草單位中國食品藥品檢定研究院中國人民解放軍第四軍醫大學冠昊生物科技股份有

:、、

限公司

。

本標準主要起草人徐麗明邵安良陸艷趙紅妮金巖張勇杰湯銀喜張偉柴媛

:、、、、、、、、。

Ⅰ

YY/T1561—2017

引言

動物源性生物材料及含動物源性生物材料的醫療器械或異種器官中殘留的抗原是該類生物材料及

器官移植中超急性免疫排斥反應及慢性免疫毒性的主要因素盡管動物源性生物材料在制備過程中經

。

過了脫細胞和去除抗原的處理但殘留的異種抗原仍存在著導致慢性免疫毒性反應的風險

,。

已有研究顯示半乳糖基抗原或是引起動物源性生物材料

α-(α1,3galactosyle,Alpha1,3Galα-Gal)

或異種器官移植時超急性免疫排斥反應的主要靶抗原的結構為

。α-GalGalα1-3Galβ1-4GlcNAc-R,

該抗原是半乳糖基與細胞膜上的蛋白或脂結合構成的一組完全性抗原主要受半乳糖基

。α-Galα-1,3

轉移酶及異紅細胞糖苷酯合成酶

(α1,3-galactosyltransferase,α-GT)(isoglobotriosylceramidesynthase

或調控由于人體及類人猿古世紀猴的半乳糖苷轉移酶基因有個

isogloboside3synthase,iGb3S)。、2

堿基錯位變異而不表達抗原但人腸道菌群持續表達抗原這種刺激致使人體免疫系統持

α-Gal,α-Gal,

續產生抗抗體達到循環免疫球蛋白的因此當人體接受含有抗原的生物材料

α-Gal,1%~3%。,α-Gal

或異種器官移植時會引起超急性免疫排斥反應及慢性的免疫毒性反應動物源性生物材料或異種器官

。

移植中抗原的去除成為降低免疫排斥反應和慢性免疫毒性反應的關鍵之一目前尚無動物源

α-Gal。,

性生物材料中殘留抗原的定量檢測方法本標準通過使用抗原特異性單克隆抗體

α-Gal。α-GalM86,

以人工合成的抗原與抗原陰性基質混合作為參照品建立標準曲線通過競爭性

Gal-BSAGal,ELISA

抑制方法定量檢測動物源性生物材料中殘留的抗原同時試驗體系中加入了抗原陽性和

α-Gal。,Gal

陰性參考品使試驗的靈敏性和特異性得以監控

,。

競爭性抑制方法是一種常用的方法其原理是首先將標準曲線樣品及試驗樣品的

ELISA,:α-Gal

抗原與抗體反應消耗部分抗體然后用作為固相抗原通過方法檢測第

M86(M86);Gal-BSA,ELISA

一次反應后上清液中的剩余抗體進而可利用標準曲線計算待測物中的抗原含量由于第

M86;α-Gal。

一次待測物中的抗原與抗體的反應對后續的剩余抗體與固相抗原的反應構

α-GalM86M86Gal-BSA

成了抑制效應故稱為抑制法

,ELISA。

Ⅱ

YY/T1561—2017

組織工程醫療器械產品

動物源性支架材料殘留α-Gal抗原檢測

1范圍

本標準給出了組織工程醫療器械產品支架材料制備時使用的動物源性生物材料中殘留抗原

α-Gal

的定量檢測方法

。

本標準適用于制備組織工程醫療器械產品支架材料的各種動物來源的生物材料或其衍生物的

抗原檢測

α-Gal。

2規范性引用文件

下列文件對于本文件的應用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

醫療器械生物學評價第部分醫療器械免疫毒理學試驗原則與方法

GB/T16886.2020:

(GB/T16886.20—2015,ISO/TS10993-20:2006,IDT)

組織工程醫療產品第部分動物源性生物材料殘留量測定法熒光染

YY/T0606.2525:DNA:

色法

3術語和定義

和界定的術語和定義適用于本文件

GB/T16886.20YY/T0606.25。

4試劑和儀器

41試劑

.

試劑包括

:

磷酸鹽緩沖液

a)(PBS,phosphatebufferedsaline,pH7.4);

碳酸鹽緩沖液

b)(pH9.5);

市售分裝后保存

c)α-GalEpitope(Galα1-3Galβ1-4GlcNAc-R),mAb(M86),-20℃;

市售簡稱溶于去離子水中分裝后保存

d)Galα1-3gal-BSA(3atomspacer,Gal-BSA),,-20℃

備用

;

辣根酶標記的山羊抗小鼠二抗

e)(IgM-HRP);

顯色液

f)TMB(3,3',5,5'-Tetramethylbenzidine);

血清白蛋白

g);

裂解液市售品其主要組