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文檔簡介

實驗一

紙色譜和薄層色譜楊俊致知樓#1574/1531Email:junyang@基礎有機化學實驗學習色譜法的原理掌握薄層色譜和紙色譜分離和鑒定化合物操作實驗目的

利用混合物各組分在固定相和流動相中的分配平衡常數的差異進行分離。當帶有樣品的流動相流經固定相時，由于固定相對各組分的吸附或溶解性能的不同，使吸附力較弱獲溶解度較小的組分在固定相中移動速度較快，經過多次反復平衡，將混合物中各組分分離。色譜法的一般原理按操作分：薄層色譜、柱色譜、紙色譜、氣相色譜和高效液相色譜按原理分：吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜和凝膠滲透色譜薄層色譜薄層色譜：薄層色譜(ThinLayerChromatography)，常用

TLC

表示，是一種微量，快速和簡便的色譜方法。一般是將固定相，如硅膠和三氧化鋁，負載在一張薄層板上，將樣品置于固定相之后，流動相通過毛細管效應從下往上流動而使樣品分開。TLC是有機化學實驗室中使用的非常多實驗操作，常常用來檢測反應和柱色譜前判斷使用展開劑的極性。薄層色譜實驗藥品和儀器藥品：偶氮苯，蘇丹紅，混合物(自配)，環己烷/乙酸乙酯=9:1儀器：TLC板，毛細管，廣口瓶，鉛筆1cm1cm1.準備TLC板2.展開展開劑：環己烷/乙酸乙酯=9:13.干燥、顯色自身有顏色有共軛體系的使用紫外燈各種顯色劑4.計算Rf

值Rf=D1/D25.分析結果通過比較Rf

值，確定混合物中各組分分別是什么物質紙色譜(PaperChromatography)：紙色譜法是以紙作為載體的色譜法。按分離原理屬于分配色譜法的范疇。固定相一般為濾紙纖維上吸附的水分，流動相(展開劑)為有機溶劑。紙色譜實驗藥品和儀器藥品：甘氨酸，亮氨酸，混合物(自配)，展開劑：水/正丁醇/醋酸5:4:1，取上層液體儀器：濾紙，大試管，帶鉤塞子，鉛筆實驗操作類似于TLC展開裝置圖

兩張色譜濾紙，分別點上甘氨酸/

混合物;亮氨酸/混合物使用茚三酮乙醇溶液進行顯色

通過比較Rf

值確定混合物中各

組分。薄層板(1)二塊15×3cm玻片，洗凈，控水(2)調糊：3g硅膠G和8mL0.5%羧甲基纖維素鈉水溶液在小燒杯中攪勻(3)用小勺取適量于玻片上粗鋪平，手指輕彈玻片，反復數次，使糊狀物均勻地鋪在玻片上于室溫下晾干，每人鋪二塊(4)活化：將晾干的薄層板放在烘箱中，待烘箱溫度升

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