實驗細菌的人工培養

實驗細菌的人工培養第一頁，共二十四頁，2022年，8月28日實驗目的了解人工培養基的制作。了解細菌的接種方法分離培養方法——平板劃線法（混合菌液）了解細菌的生長現象與代謝產物液體、固體、半固體培養基乳糖發酵實驗硫化氫實驗第二頁，共二十四頁，2022年，8月28日實驗內容瓊脂平板的制作

紫外線殺菌實驗咽拭實驗分組實驗皮膚消毒實驗空氣中細菌計數實驗藥敏實驗

常用消毒器械的介紹

第三頁，共二十四頁，2022年，8月28日

一、人工培養基的制備和種類1.制備原則2.制備程序3.常用培養基的分類

第四頁，共二十四頁，2022年，8月28日1.制備原則（1）適當的營養成分；（2）合適的酸堿度；（3）配制后經滅菌使之無菌，方可應用。第五頁，共二十四頁，2022年，8月28日2.制備程序配料→熔化→測定及矯正PH→濾過→分裝→滅菌→備用第六頁，共二十四頁，2022年，8月28日3.常用培養基的分類（一）按物理性狀分：液體培養基固體培養基:1.5～2.5%瓊脂

半固體培養基:0.3～0.5%瓊脂（二）按用途不同可分：基礎培養基；營養培養基；選擇培養基；鑒別培養基；厭氧培養基。第七頁，共二十四頁，2022年，8月28日二.細菌接種法1.平板培養基接種法（操作）

2.斜面培養基接種法（示教）

3.液體培養基接種法（示教）

4.半固體培養基接種法（示教）

第八頁，共二十四頁，2022年，8月28日

1.平板培養基接種法（操作）密集劃線法分區劃線法

第九頁，共二十四頁，2022年，8月28日接種大腸桿菌接種枯草桿菌班級、姓名/學號、大腸枯草uv30’培養箱第十頁，共二十四頁，2022年，8月28日第十一頁，共二十四頁，2022年，8月28日培養基的用途菌落

液體：增菌、純培養半固體：動力、保存菌種固體平板：用于分離培養第十二頁，共二十四頁，2022年，8月28日三.細菌生長現象及代謝產物觀察（示教）1.細菌在培養基中的生長現象（1）液體培養基：混濁、菌膜和沉淀。（2）固體培養基：菌落和菌苔。（3）半固體培養基：沿穿刺線生長，穿刺線清晰，周圍培養基仍為透明，動力陰性；穿刺線向周圍擴散生長，穿刺線模糊，整個培養基變成混濁，動力陽性。2.細菌的代謝產物觀察（1）細菌對糖分解產物觀察（2）細菌對氨基酸分解產物觀察第十三頁，共二十四頁，2022年，8月28日（1）液體培養基均勻混濁生長（葡萄球菌）菌膜形成（枯草芽孢桿菌）沉淀生長（鏈球菌）第十四頁，共二十四頁，2022年，8月28日（2）固體培養基形成菌落和菌苔。觀察菌落的大小、形態、透明度、顏色、表面和邊緣情況及菌落周圍有無溶血環等。第十五頁，共二十四頁，2022年，8月28日（3）半固體培養基可用于觀察細菌有無動力。痢疾志賀菌沿穿刺線生長，穿刺線清晰，周圍培養基仍為透明，動力陰性；大腸埃希菌沿穿刺線向周圍擴散生長，穿刺線模糊，整個培養基變成混濁，動力陽性。第十六頁，共二十四頁，2022年，8月28日2.細菌的代謝產物觀察（1）細菌對糖分解產物觀察

方法：將大腸埃希菌和傷寒沙門菌分別接種于葡萄糖、乳糖發酵培養基中，置37度24小時培養后觀察結果。結果：大腸埃希菌分解葡萄糖、乳糖，產酸產氣；傷寒沙門菌分解葡萄糖產酸不產氣，不分解乳糖。第十七頁，共二十四頁，2022年，8月28日糖發酵試驗第十八頁，共二十四頁，2022年，8月28日2.細菌的代謝產物觀察（2）細菌對氨基酸分解產物觀察

靛基質試驗：分別接種大腸埃希菌和傷寒沙門菌于蛋白胨水培養基（含色氨酸）內，置37度24小時培養后，然后沿管壁徐徐加入靛基質試劑（對二甲基醛）數滴，靜置片刻，在兩液界面出現紅色環者為靛基質試驗陽性（大腸埃希菌），無紅色環者為陰性（傷寒沙門菌）。第十九頁，共二十四頁，2022年，8月28日Indol實驗生化反應——Indol實驗第二十頁，共二十四頁，2022年，8月28日2.細菌的代謝產物觀察（2）細菌對氨基酸分解產物觀察硫化氫試驗：將細菌接種于含有硫酸亞鐵或醋酸鉛的培養基（如雙糖培養基）中，若細菌分解培養基中含硫的氨基酸產生硫化氫，硫化氫可與硫酸亞鐵或醋酸鉛反應，生成黑色的硫化鐵或硫化鉛沉淀，為硫化氫試驗陽性（乙型副傷寒沙門菌），若細菌不能分解含硫的氨基酸則無黑色沉淀形成，為硫化氫試驗陰（大腸埃希菌）。第二十一