GB/T 19915.5-2005豬鏈球菌2型多重PCR檢測方法

ICS07.100.30C53中華人民共和國國家標準GB/T：19915.5—2005豬鏈球菌2型多重PCR檢測方法ProtocolofmultiplexPCRidentificationofSirepiococcussuistype22005-09-27發布2005-11-01實施中華人民共和國國家質量監督檢驗檢疫總局發布中國國家標準化管理委員會

中華人民共和國國家標準豬鏈球菌2型多重PCR檢測方法GB/T19915.5—2005中中國標準出版社出版發行北京西城區復興門外三里河北街16號郵政編碼：100045電話：63787337、637874472005年12月第一版2005年12月電子版制作書號：155066·1-26804版權專有侵權必究舉報電話：（010)68533533

GB/T19915.5-2005前本標準的附錄A為規范性附錄本標準由國家標準化管理委員會提出。本標準由全國動物防疫標準化技術委員會歸口本標準由中國檢驗檢疫科學研究院負責起草。本標準主要起草人：韓雪清、林祥梅、吳紹強、劉建、賈廣樂、梅琳、陳國強、張敬友、姜淼、唐泰山。本標準為首次發和

GB/T19915.5—2005豬鏈球菌2型多重PCR檢測方法范圍本標準規定了豬鏈球菌2型多重PCR檢測的操作方法。本標準適用于檢測生豬執子、增菌培養物、疑似病料及豬組織樣品(豬淋巴結、扁桃體、肉品等)中的褚源鏈球菌及豬鏈球菌2型。規范性引用文件下列文件中的條款通過本標準的引用而成為本標準的條款。凡是注日期的引用文件,其隨后所有的修改單(不包括勒誤的內容)或修訂版均不適用于本標準,然而,鼓勵根據本標準達成協議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標準。GB/T6682-1992分析實驗室用水規格和試驗方法。3術語和定義下列術語和定義適用于本標準豬鏈球菌2型Srrepiococcussuistype2豬鏈球菌是屬于鏈球菌屬的一種細菌,根據其英膜多糖抗原的差異,可分為1～34及1/2共35個血清型。豬鏈球菌2型是豬鏈球菌的一個血清型,不僅對豬致病性很強，而且可以感染特定的人群,是一種重要的人畜共患病病原菌。3.2多重聚合酶鏈式反應（多重PCR）multiplexpolymerasechainreaction多重PCR又稱多重引物PCR或復合PCR.它是在同一PCR反應體系中加上兩對以上引物,同時擴增出多個核酸片斷的PCR反應。4縮略語本標準采用下列縮略語：PCR聚合酶鏈式反應DNA脫氧核糖核酸dTP脫氧核酸三磷酸bp堿培對試劑和材料除另有規定外.所用生化試劑均為分析純.水為符合GB/T6682—1992的滅菌雙蒸水或超純水.5.1豬鏈球菌2型多重PCR反應混合物PCR緩沖液（含Mgt），2PL:dNTP.1.6L:引物1.0.6PL:引物2,0.6L；引物3.0.6L引物4.0.6L;菌液1.5L:酶0.2L;水12.3L；總體積20L。5.2TaqDNA聚合酶5.310×P