GB/T 17999.1-1999SPF雞紅細胞凝集抑制試驗

TCS.65.020.30B41中華人民共和國國家標準GB/T17999.1—1999SPF雞紅細胞凝集抑制試驗SPFchicken-Hemagglutinationinhibitiontest1999-11-10發(fā)布2000-04-01實施國家質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布

GB/T17999.1-1999本標準以我國建立的HI方法為基礎(chǔ),參照美國SPAFAS公司的有關(guān)操作規(guī)程.規(guī)定了SPF雞紅細胞凝集抑制試驗SPF雞微生物學質(zhì)量控制國家系列標準包括SPF雞微生物學監(jiān)測總則和9種SPF雞微生物學檢測方法。本標準為《SPF雞紅細胞凝集抑制試驗》。SPF雞微生物學檢測方法還包括以下部分：GB/T17999.2—1999SPF雞血清中和試驗;GB/T17999.3—1999SPF雞血清平板凝集試驗;GB/T17999.4—1999SPF雞瓊脂擴散試驗；GB/T17999.5—1999SPF雞酶聯(lián)免疫吸附試驗;GB/T17999.6-1999SPF雞胚敏感試驗：GB/T17999.7—1999SPF雞雞白癇沙門氏菌檢驗;GB/T17999.8-1999SPF雞，試管凝集試驗；GB/T17999.9—1999SPF雞間接免疫熒光試驗本標準由中華人民共和國農(nóng)業(yè)部、國家科學技術(shù)部提出本標準由農(nóng)業(yè)部畜牧獸醫(yī)司歸口。本標準起草單位：農(nóng)業(yè)部實驗動物研究中心、山東省農(nóng)科院家禽研究所本標準主要起草人：陳德威、趙立紅、靳彥華、張秀美、李軍。

中華人民共和國國家標準GB/T17999.1-1999SPF雞紅細胞凝集抑制試驗SPFchicken--Hemagglutinationinhibitiontes11范圍本標準規(guī)定了紅細胞凝集抑制試驗所用試劑、材料,操作程序及結(jié)果判定等本標準適用于SPF雞感染以下病原微生物后的血凝抑制抗體監(jiān)測：禽流感病毒（A型）AvianInfluenzaVirus(TypeA），傳染性支氣管炎病毒（InfectiousBronchitisVirus）新城疫病毒（NewcastleDiseaseVirus），禽腺病毒I群(減蛋綜合癥）（AvianAdenovirusGroupI），雞毒支原體（MycoplasmaGallisepticum）,滑液囊支原體(MycoplasmaSynoviae)。2原理許多病毒具有凝集動物紅細胞的能力，這種凝集紅細胞的能力能被特異性抗體所抑制.因此可用已知病毒檢測相應的血凝抑制性抗體3試劑和器材3.1試劑3.1.1血凝抗原3.1.2陰性、陽性血清。3.1.3被檢血清。3.1.4紅細胞、3.1.50.85%生理鹽水。3.1.6阿氏液3.2器材3.2.196孔微量血凝板(U型）3.2.2微量移液器(TD10L.～200L.)及吸頭3.2.3水浴鍋。3.2.4離心機與錐形刻度離心管。4操作程序4.1抗原血凝效價測定4.1.110%和0.5%雞紅細胞液的制備4.1.1.1采雞血:用注射器吸取阿氏液約1mL.取3日齡～10日齡SPF雞(最少兩只),從胸骨尖下方約1.3cm處將注射器針頭刺入心臟,吸取心血約2mL～4mL,與阿氏液輕輕混合，放入裝有10mL阿氏液的離心管中。4.1.1.2洗滌雞紅細胞：將離心管中的血液經(jīng)1500r/min～1800r/min離心8min.棄上清液，沉淀物加入阿氏液，輕輕混合后,再經(jīng)