醫學分子生物學原理之蛋白質的研究歷史與方法

蛋白質的研究歷史與方法第一節蛋白質研究的歷史回顧

蛋白質是一類重要的生物大分子，protein字源出自希臘文，是“最原初的”，“第一重要的”意思

19世紀30年代中期以前，認識其化學元素組成情況及原子之間結合比例，即確定經驗性的分子式

蛋白質(protein)是由許多氨基酸(aminoacids)通過肽鍵(peptidebond)相連形成的具有特定空間結構的高分子含氮化合物組成蛋白質的元素主要有C、H、O、N和S

有些蛋白質含有少量磷或金屬元素鐵、銅、鋅、錳、鈷、鉬，個別蛋白質還含有碘

H甘氨酸CH3丙氨酸L-氨基酸的通式R兩性解離及等電點氨基酸是兩性電解質，其解離程度取決于所處溶液的酸堿度等電點(isoelectricpoint,pI)

pH=pI+OH-pH>pI+H++OH-+H+pH<pI氨基酸的兼性離子陽離子陰離子在某一pH的溶液中，氨基酸解離成陽離子和陰離子的趨勢及程度相等，氨基酸分子呈電中性。此時溶液的pH值稱為該氨基酸的等電點

1937年，A.W.k.Tiselius

建立了研究蛋白質的移動界面電泳(electrophoresis)方法,于1948年獲諾貝爾化學獎

1941年，A.J.P.Martin和R.L.M.Synge建立了分配層析(partitionchromatography)技術，被授予1952年的諾貝爾化學獎

TheNobelPrizeinChemistry1948"forhisresearchonelectrophoresisandadsorptionanalysis,especiallyforhisdiscoveriesconcerningthecomplexnatureoftheserumproteins"ArneW.K.TiseliusUppsalaUniversity

Uppsala,Sweden

1902-1971TheNobelPrizeinChemistry1952"fortheirinventionofpartitionchromatography"ArcherJ.P.MartinRichardL.M.Synge

1/2oftheprize1/2oftheprizeNationalInstituteforMedicalResearchLondon,UnitedKingdom

RowettResearchInstituteBucksburn(Scotland),UnitedKingdom1910-20021914-1994

1953年，F.Sanger利用紙層析和紙電泳技術第一次揭示出牛胰島素的一級結構，開創了以后數千種蛋白質序列分析的先聲，被授予1958年諾貝爾化學獎

TheNobelPrizeinChemistry1958"forhisworkonthestructureofproteins,especiallythatofinsulin"FrederickSanger

UniversityofCambridge

Cambridge,UnitedKingdom

1918–2013年11月TheNobelPrizeinChemistry1980"forhisfundamentalstudiesofthebiochemistryofnucleicacids,withparticularregardtorecombinant-DNA""fortheircontributionsconcerningthedeterminationofbasesequencesinnucleicacids"PaulBerg1/2oftheprizeStanfordUniversityStanford,CA,USA1926-WalterGilbertFrederickSanger1/4oftheprize1/4oftheprize

HarvardUniversity,BiologicalLaboratoriesCambridge,MA,USAMRCLaboratoryofMolecularBiologyCambridge,UnitedKingdom1932-1918-2013年11月

J.C.Kendrew(1958)及M.F.Perutz(1960)利用X射線技術解析了肌紅蛋白(myoglobin)和血紅蛋白(hemoglobin)的三維結構，使人們第一次能夠洞察生物大分子的空間結構，共同贏得了1962年的諾貝爾化學獎

TheNobelPrizeinChemistry1962"fortheirstudiesofthestructuresofglobularproteins"

MaxFerdinandPerutz1/2oftheprizeMRCLaboratoryofMolecularBiologyCambridge,UnitedKingdom1914-2002JohnCowderyKendrew1/2oftheprizeMRCLaboratoryofMolecularBiologyCambridge,UnitedKingdom1917-1997

20世紀70年代中后期，GunterBlobel利用體外蛋白質翻譯系統發現動物細胞中很多分泌蛋白的跨膜方式，提出“信號假說”(signalhypothesis)，獲得了1998年的諾貝爾生理醫學獎

20世紀50年代后期，E.W.Sutherland發現細胞內cAMP的存在，1971年被授予諾貝爾生理醫學獎

70年代末80年代初，A.G.Gilman和M.Rodbell獨立發現G蛋白的存在，因此二人在1994年獲得諾貝爾生理醫學獎“信號轉導”(signaltransduction)TheNobelPrizeinPhysiologyorMedicine1994"fortheirdiscoveryofG-proteinsandtheroleoftheseproteinsinsignaltransductionincells"AlfredG.GilmanMartinRodbell1941-1925-1998UniversityofTexas,SouthwesternMedicalCenterDallas,TX,USANationalInstituteofEnvironmentalHealthSciencesResearchTrianglePark,NC,USA

60年代，P.Mitchell提出“化學滲透學說”，獲1978年獲諾貝爾化學獎

70年代，P.D.Boyer提出“結合改變機制”；90年代，J.E.Walker測定ATP合酶的晶體結構，他們共享了1997年的諾貝爾化學獎

揭示能量轉化機制TheNobelPrizeinPhysiologyorMedicine1993"forcontributionstothedevelopmentsofmethodswithinDNA-basedchemistry"MichaelSmith1944-1932-2000LaJolla,CA,USAKaryB.MullisUniversityofBritishColumbiaVancouver,Canada"forhisinventionofthepolymerasechainreaction(PCR)method""forhisfundamentalcontributionstotheestablishmentofoligonucleotide-based,site-directedmutagenesisanditsdevelopmentforproteinstudies"Nature1998;391:806-811.

Potentandspecificgeneticinterferencebydouble-strandedRNAinCaenorhabditiselegans.

WhatRogerKornberghimselfhasnowdoneistodescribehowthegeneticinformationiscopiedfromDNAintowhatiscalledmessenger-RNA

Kornberghaddescribedhowgeneticinformationistransferredfromamothercelltoitsdaughters.

TheNobelPrizeinPhysiologyorMedicine2007"fortheirdiscoveriesofprinciplesforintroducingspecificgenemodificationsinmicebytheuseofembryonicstemcells"MarioR.CapecchiSirMartinJ.EvansOliverSmithies

USAUnitedKingdomUSA

UniversityofUtah

SaltLakeCity,UT,USA;HowardHughesMedicalInstitute

b.1937

(inItaly)

CardiffUniversity

Cardiff,UnitedKingdom

b.1941UniversityofNorthCarolinaatChapelHill

ChapelHill,NC,USAb.1925

(inUnitedKingdom)

TheNobelPrizeinChemistry2008"forthediscoveryanddevelopmentofthegreenfluorescentprotein,GFP"OsamuShimomuraMartinChalfieRogerY.Tsien

1/3oftheprize

1/3oftheprize

1/3oftheprize

USA

USA

USAMarineBiologicalLaboratory(MBL)

WoodsHole,MA,USA;BostonUniversityMedicalSchool

Massachusetts,MA,USAb.1928

(inKyoto,Japan)ColumbiaUniversity

NewYork,NY,USAb.1947UniversityofCalifornia

SanDiego,CA,USA;HowardHughesMedicalInstituteb.1952

TheNobelPrizeinPhysiologyorMedicine2008"forhisdiscoveryofhumanpapillomavirusescausingcervicalcancer""fortheirdiscoveryofhumanimmunodeficiencyvirus"HaraldzurHausen

Fran?oiseBarré-Sinoussi

LucMontagnier

1/2oftheprize

1/4oftheprize

1/4oftheprizeGermanyFranceFranceGermanCancerResearchCentre

Heidelberg,Germanyb.1936RegulationofRetroviralInfectionsUnit,VirologyDepartment,InstitutPasteurParis,Franceb.1947WorldFoundationforAIDSResearchandPreventionParis,Franceb.1932化學獎：/nobel/chemistry/chemistry.html/nobel_prize/chemistry/

生理/醫學獎：

/nobel/medicine/medicine.html/nobel_prizes/medicine/Summary(1)

分離純化蛋白質

測定蛋白質分子質量蛋白質結構分析蛋白質生物學活性分析探索結構與功能的關系Summary(2)

學科交叉分子生物學是一門實踐性、應用性強的學科

生化方法學是在不斷發展的

蛋白質樣品的提取目的蛋白的獲取直接從生物體內獲取基因工程表達重組蛋白采用免疫學方法獲取相關抗體獲取蛋白質的編碼序列(cDNA)基因組測序基因組測序進行推導獲取部分肽段氨基酸序列捕獲相應蛋白質經典的細胞蛋白質分離純化流程由下述主要步驟組成：清洗組織或細胞裂解細胞離心除去膜組分等獲得可溶性蛋白質離心、層析、電泳等進一步純化獲取產物蛋白一、細胞的破碎各種組織和細胞的常用破碎方法細胞破碎方法組織種類

旋刀式勻漿大多數動、植物組織手動式勻漿柔軟的動物組織高壓勻漿細菌、酵母、植物細胞研磨細菌、植物細胞高速珠磨細胞混懸液酶溶細菌、酵母去垢劑滲透組織培養細胞有機溶劑滲透細菌、酵母超聲破碎細胞混懸液低滲裂解紅細胞、細菌凍融裂解培養細胞

二、去污劑處理溶解膜蛋白

去污劑為雙極性(amphipathic)脂類分子，可在水中溶解。通常由線性或帶有分枝的碳氫化合物尾部和結構各不相同的親水性頭部組成SDSTritonX-100NP-40Tween-20三、蛋白質分子的穩定

在蛋白質提取過程中，需要加入蛋白酶抑制劑以防止蛋白水解PMSF(35ug/ml)EDTA(0.3mg/ml)Pepstatin(0.7ug/ml)Leupeptin(0.5ug/ml)Aprotinin(500unit/ml)

目的：保證蛋白質的生物活性

細胞內有許多種還原成分，一旦細胞破碎由于和氧的接觸以及稀釋作用而使抗氧化成分減少，導致許多蛋白質被氧化而失去活性，如巰基蛋白

常用的還原劑

抗壞血酸巰基乙醇(mercaptoethanol)

二硫蘇糖醇(dithiothreitol,DTT)

蛋白質的環境因素

表面效應溫度儲存四、離心去除細胞碎片五、目標蛋白的純化

1.鹽析

(saltingout)2.離子交換層析3.凝膠過濾層析4.親和層析蛋白質的檢測和鑒定光譜學特性190～200nm230～300nm電泳檢測SDSIEF分子量測定凝膠過濾層析沉降平衡超速離心動態彈性光散射孔徑梯度電泳質譜氨基酸序列測定用抗體檢測蛋白質蛋白質免疫印跡免疫共沉淀一類是測定溶液中蛋白質分子的結構

如核磁共振(NMR)、圓二色譜法、激光拉曼光譜法、熒光光譜法、紫外差光譜法以及氫同位素交換法

另一類是測定晶體蛋白質的分子結構

如X射線衍射分析法、小角中子衍射法

蛋白質空間結構分析蛋白質分子的生物學功能研究基因敲除技術細胞轉染技術酵母雙雜交系統蛋白質研究的發展趨勢一、單個蛋白質到所有蛋白質全方位生物學，高通量研究1.蛋白質組學一種細胞或一種組織在某種狀態條件下所有蛋白質的定性和定量分析的研究思路。2.蛋白質芯片技術二、從統計行為到單個分子行為三、從體外活性到體內功能每一種蛋白質至少都有一種構象在生理條件下是穩定的，并具有生物活性，這種構象稱為蛋白質的天然構象。蛋白質的天然折疊決定于3個因素1.蛋白質的氨基酸序列2.與溶劑分子(一般是水)的相互作用3.溶劑的pH和離子組成蛋白質結構的基礎一、蛋白質的天然構象二、穩定蛋白質三維結構的作用力a離子鍵b氫鍵c疏水鍵d范德華引力

三、多肽主鏈的空間限制

(一)酰胺平面與α-碳原子的二面角(φ和ψ)

(二)可允許的φ和ψ值：拉氏構象圖二面角

(φ和ψ)所規定的構象能否存在取決于兩個相鄰肽單位中非共價鍵合原子之間的接近有無阻礙。（四）二級結構：多肽鏈折疊的規則方式二級結構：是指多肽鏈借助主鏈基團（C＝OH－N）形成氫鍵排列成有規則的構象。α螺旋、β折疊片層、β轉角和無規則卷曲。四、二級結構：多肽鏈折疊的規則方式

(一)α-螺旋

1950年美國Pauling等人在研究纖維狀蛋白質時，提出了α-螺旋，后來發現在球狀蛋白質分子中也存在α-螺旋。

α-螺旋結構要點：①蛋白質多肽鏈像螺旋一樣盤曲上升，每3.6個氨基酸殘基螺旋上升一圈，每圈螺旋的高度為0.54nm，每個殘基沿軸向高度0.15nm，螺旋上升時，每個殘基沿軸旋轉100o。②

在同一肽鏈內相鄰的螺圈之間形成氫鏈。③α-螺旋有右手螺旋和左手螺旋之分，天然蛋白質絕大部分是右手螺旋，到目前為止僅在嗜熱菌蛋白酶中發現了一段左手螺旋。α-螺旋的穩定性主要靠氫鍵來維持。四、二級結構：多肽鏈折疊的規則方式影響α-螺旋形成的因素一些側鏈基團雖然不參與螺旋，但可影響α-螺旋的穩定性。在多肽鏈中連續的出現帶同種電荷的極性氨基酸，α-螺旋就不穩定。（Lys、Glu）在多肽鏈中只要出現pro，α-螺旋就被中斷，產生一個彎曲（bend）或結節（kink）。Gly的R基太小，難以形成α-螺旋所需的兩面角，所以和Pro一樣也是螺旋的最大破壞者。肽鏈中連續出現帶龐大側鏈的氨基酸如Ile，由于空間位阻，也難以形成α-螺旋。四、二級結構：多肽鏈折疊片的規則方式(二)β-折疊片也是pauling等人提出來的，它是與α-螺旋完全不同的一種結構。①β-折疊主鏈骨架以一定的折疊形式形成一個折疊的片層。②α碳原子位于折疊線上，在兩條相鄰的肽鏈之間形成氫鏈。四、二級結構：多肽鏈折疊的規則方式(二)β-折疊片③β-折疊有平行和反平行的兩種形式:平行的β-折疊疏水側鏈位于平面的兩側，反平行時疏水側鏈位于平面的同一側。四、二級結構：多肽鏈折疊的規則方式(三)β-轉角(β-turn)β-轉角是指蛋白質的分子的多肽鏈經常出現180o的回折，在回折角上的結構就稱β-轉角，也稱發夾結構，或稱U形轉折。由第一個氨基酸殘基的C=O與第四個氨基酸殘基的N—H之間形成氫鍵。四、二級結構：多肽鏈折疊的規則方式(四)無規卷曲無規卷曲是指沒有規律性的肽鏈結構，但許多蛋白質的功能部位常常埋伏在這里。四、二級結構：多肽鏈折疊的規則方式

Ω環存在于球狀蛋白質中的一種新的二級結構，這種結構的形狀象希臘字Ω，所以稱Ω環。Ω環特征：1、由不超過16個殘基(最常見的是由6—8個殘基)組成的肽段；2、這個肽段改變了蛋白質肽鏈的走向，構成Ω環的首尾兩個殘基間的距離小于1nm。五、纖維狀蛋白質

分布在動物(脊椎動物和無脊椎動物)體內存在大量纖維狀蛋白質。功能為結構蛋白，纖維狀蛋白質是動物體的基本支架和外保護成分。含量占脊椎動物體內蛋白質總量的一半以上。形狀外形呈纖維狀或細棒狀。分類不溶性(硬蛋白)和可溶性兩類不溶性纖維狀蛋白角蛋白、膠原蛋白和彈性蛋白可溶性纖維狀蛋白肌球蛋白和血纖蛋白原五、纖維狀蛋白質角蛋白(keratin)來源于外胚層細胞，是外胚層細胞的結構蛋白質。角蛋白包括皮膚以及皮膚的衍生物：發、毛、鱗、羽、翮(hé鳥翎的莖)、甲、蹄、角、爪、啄等。角蛋白可分為α-角蛋白和β-角蛋白兩類。(一)α-角蛋白五、纖維狀蛋白質絲心蛋白(fibroin)

是蠶絲和蜘蛛絲的一種蛋白質。絲心蛋白的性能絲心蛋白具有抗張強度高，質地柔軟的特性。具有0.7nm的周期。絲心蛋白的構象絲心蛋白是典型的反平行β折疊片，多肽鏈取鋸齒狀折疊構象。側鏈交替地分布在折疊片的兩側。反平行β折疊片以平行的方式堆積成多層結構。鏈間主要氫鍵連接，層間主要靠范德華力維系。(二)絲心蛋白和其他β-角蛋白：β-折疊片蛋白質五、纖維狀蛋白質(三)膠原蛋白：一種三股螺旋五、纖維狀蛋白質(四)彈性蛋白彈性蛋白(elastin)是結締組織中的另一種蛋白質。它的最重要性質就是彈性，因此得名。彈性蛋白使肺、血管特別是大動脈管以及韌帶等具有伸展性。彈性蛋白與膠原蛋白的不同點彈性蛋白只有一個基因，膠原蛋白每種亞基都有自己的基因；彈性蛋白富含Gly、Ala、Val和Pro。彈性蛋白是由可溶性單體合成的，它是彈性蛋白纖維的基本單位，稱原彈性蛋白。Lys的賴氨酰氧化酶的催化氧化脫氨成醛基，3個這樣Lys和未被修飾的Lys形成類吡啶啉鎖鏈素和異鎖鏈素交聯體。使原彈性蛋白交聯成網。五、纖維狀蛋白質(四)彈性蛋白六、超二級結構和結構域(一)超二級結構由若干個相鄰的二級結構元件組合在一起，彼此相互作用，形成種類不多的、有規則的二級結構組合或二級結構串，在多種蛋白質中充當三級結構的構件，稱為超二級結構。六、超二級結構和結構域(二)結構域（Structuraldomain,domain）多肽鏈在二級結構或超二級結構的基礎上形成三級結構的局部折疊區，它是獨立的緊密球狀實體稱為結構域。鐵氧還蛋白（一個結構域）功能域（酵母已糖激酶2個結構域）六、超二級結構和結構域(二)結構域（Structuraldomain,domain）(2)多肽鏈折疊中的手性效應發夾右手左手右手左手六、超二級結構和結構域(二)結構域（Structuraldomain,domain）(2)多肽鏈折疊中的手性效應馬鞍形扭曲片平行β桶六、超二級結構和結構域(二)結構域（Structuraldomain,domain）(3)結構域類型反平行α螺旋結構域(全α結構)平行或混合型β折疊片結構域(α,β結構)反平行β折疊片結構域(全β結構)富含金屬或二硫鍵結構域七、球狀蛋白質與三級結構(一)球狀蛋白質的分類1.全α結構(反平行α螺旋)蛋白質2.α,β結構(平行或混合型β折疊片)蛋白質3.全β結構(反平行β折疊片)蛋白質4.富含金屬或二硫鍵（小的不規則）蛋白質七、球狀蛋白質與三級結構(二)球狀蛋白質三維結構的特征

1.蛋白質分子含多種二級結構元件

2.三維結構具有明顯的折疊層次

3.分子是緊密的球狀或橢球狀實體

4.疏水側鏈埋藏在分子內部，親水側鏈暴露在分子表面

5.球狀蛋白質分子的表面有一個空穴八、膜蛋白的結構膜蛋白是膜的功能分子膜蛋白質與纖維狀蛋白質及球狀蛋白質結構不同膜蛋白質可分為膜周邊蛋白質和膜內在蛋白質膜周邊蛋白質(peripheralprotein)實際上屬于可溶性球狀蛋白質，它們分布在膜雙脂層的表面，主要通過與膜內在蛋白質的靜電相互作用和氫鍵鍵合相互作用與膜結合。膜內在蛋白質(integralprotein）是與脂雙層強締合的膜蛋白。它們有的一部分或大部分埋入脂雙層，有的橫跨脂雙層。脂錨定蛋白質（lipidanchoredprotin）這些蛋白質與膜的締合是通過各種共價連接的脂錨鉤實現的。八、膜蛋白的結構（一）膜內在蛋白質1.具有單個跨膜肽段的膜蛋白人血型糖蛋白人白細胞結合蛋白八、膜蛋白的結構（一）膜內在蛋白質2.具有7個跨膜肽段的膜蛋白（G蛋白偶聯受體）細菌的紫膜質八、膜蛋白的結構（一）膜內在蛋白質3.β桶型膜蛋白－膜孔蛋白麥芽糖膜孔蛋白八、膜蛋白的結構（二）脂錨定膜蛋白1.酰胺連接的豆蔻酰錨鉤2.硫酯連接的脂肪酰錨鉤：3.硫醚連接的異戊二烯錨鉤：4.糖基磷脂酰肌醇錨鉤八、膜蛋白的結構（二）脂錨定膜蛋白1.酰胺連接的豆蔻酰錨鉤：cAMP依賴性蛋白激酶催化亞基，HIV－1的gag蛋白等八、膜蛋白的結構（二）脂錨定膜蛋白2.硫酯連接的脂肪酰錨鉤：轉鐵蛋白受體、某些病毒的表面糖蛋白受體等八、膜蛋白的結構（二）脂錨定膜蛋白3.硫醚連接的異戊二烯錨鉤：酵母交配因子，核纖蛋白等八、膜蛋白的結構（二）脂錨定膜蛋白4.糖基磷脂酰肌醇錨鉤：真核生物細胞表面抗原。粘著分子和細胞表面水解酶，原核中未見。九、蛋白質折疊和結構預測(一)蛋白質的變性物理因素：熱紫外線照射、高壓、微波和表面張力等。化學因素：有機溶劑、脲、胍、酸和堿等生物活性的喪失；內部的側鏈暴露；物理化學性質發生改變；生物化學性質發生改變，易被酶水解等。變性劑：脲素和鹽酸胍；十二烷基磺酸鈉（SDS）。九、蛋白質折疊和結構預測(二)氨基酸序列規定蛋白質的三維結構1.核糖核酸酶的變性與復性實驗2.二硫橋在穩定蛋白質構象中的作用九、蛋白質折疊和結構預測(三)蛋白質折疊1.蛋白質折疊不是通過隨機搜索找到自由能最低的構象2.用于研究折疊中間體的一些方法3.蛋白質折疊經過熔球態的中間體階段4.體內蛋白質折疊有異構酶和伴侶蛋白質參加

二硫鍵異構酶（PDI）分子伴侶（MolecularChaperone）

Hsp70蛋白－ATP酶結構域和肽結合結構域九、蛋白質折疊和結構預測圖5-46(一)蛋白質的變性(二)氨基酸序列規定蛋白質的三維結構1.核糖核酸酶的變性與復性實驗2.二硫橋在穩定蛋白質構象中的作用(三)蛋白質折疊的熱力學(四)蛋白質折疊的動力學1.蛋白質折疊不是通過隨機搜索找到自由能最低的構象2.用于研究折疊中間體的一些方法3.蛋白質折疊經過熔球態的中間體階段4.體內蛋白質折疊有異構酶和伴侶蛋白質參加(五)蛋白質結構的預測1.二級結構的預測Glu、Met、Ala、Leu在α螺旋中出現頻率高。Gly、Pro、Ser、Thr、Asn、Ile不利于α螺旋的形成；Gly、Pro在β轉角中很高。Val、Ile及芳香族氨基酸在β折疊片中頻率高。而Asp、Glu、和Pro則很低。Chou和Fasman二級結構預測的經驗規則：（殘基傾向性因子）Pi=Ai/Ti

(1)α螺旋預測：4/6→4,Pα≥1.03,Pα>

P

β(2)β折疊預測：3/5→4(3)β轉角預測：Pt≥1.0,>Pα和

P

β其他預測法：GOR算法，多序列列線預測，基于神經網絡的序列預測，混合方法等。2.三級結構的預測—折疊的計算機模擬九、蛋白質折疊和結構預測十、亞基締合和四級結構圖5-46(一)蛋白質的變性(二)氨基酸序列規定蛋白質的三維結構1.核糖核酸酶的變性與復性實驗2.二硫橋在穩定蛋白質構象中的作用(三)蛋白質折疊的熱力學(四)蛋白質折疊的動力學1.蛋白質折疊不是通過隨機搜索找到自由能最低的構象2.用于研究折疊中間體的一些方法3.蛋白質折疊經過熔球態的中間體階段4.體內蛋白質折疊有異構酶和伴侶蛋白質參加(一)有關四級結構的一些概念蛋白質的四級結構球狀蛋白質通過非共價鍵彼此締合在一起，形成的聚集體，就是蛋白質的四級結構。亞基或單體四級結構的蛋白質中每個球狀蛋白質稱為亞基，有時也稱單體(monomer)。亞基一般是一條多肽鏈。寡聚蛋白質由兩個或兩個以上亞基組成的蛋白質統稱為寡聚蛋白質。很多酶和轉運蛋白質是寡